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分选连接蛋白3基因文献资料
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过表达人SNX3改变SW620结直肠腺癌细胞的形态
目的 通过过表达人分选连接蛋白3基因(hSNX3),以探讨hSNX3对结直肠腺癌细胞形态和迁移能力的影响.方法 运用基因重组技术将hSNX3基因连接到含有GFP的慢病毒表达载体pEZ-Lv201(pEZ-SV40-eGFP-IRES-Puro)中,构建慢病毒载体pEZ-hSNX3-Lv201,感染结直肠腺癌SW620细胞,获得SNX3稳定过表达的结直肠腺癌细胞,并观察细胞形态和细胞迁移能力及相关蛋白分子的变化.结果 经测序鉴定后,成功构建了慢病毒载体pEZ-hSNX3-Lv201,包装后慢病毒滴度测定为2.12×109拷贝/mL,对照慢病毒滴度为7.9×1010拷贝/mL.重组慢病毒感染SW620细胞后,经克隆筛选和Western blot法鉴定,获得了稳定过表达hSNX3的SW620hSNX3细胞.88％的SW620hSNX3细胞呈椭圆形而不是SW620原来的梭形,但TransweⅡlTM实验和划痕试验显示,细胞迁移能力无显著变化,迁移相关蛋白上皮型钙黏素(E-cadherin)也无明显改变.结论 hSNX3可改变SW620结直肠腺癌细胞的形态,但可能与细胞的迁移能力无关.
