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包膜糖蛋白 gp41文献资料
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基于中国HIV-1 CRF01_AE重组亚型gp41 NHR结构域亚单位疫苗的研究
目的:构建基于中国HIV-1 CRF01_AE重组亚型包膜糖蛋白gp41 NHR结构域N51的亚单位疫苗,并进行免疫原性研究.方法:设计4条引物,运用重叠延伸PCR方法扩增出N51Fd基因,将其插入真核表达载体pFUSE-hIgG1-Fc2,构建重组质粒pFUSE/N51Fd并进行序列测定.Western blot 法检测N51FdFc-AE重组蛋白的表达.用纯化蛋白免疫BALB/c小鼠后,ELISA法检测小鼠的抗体反应.结果:成功构建了pFUSE/N51Fd重组质粒,N51FdFc-AE重组蛋白在真核体系获得了高效表达,Western blot结果显示在相对分子质量(Mr)35000处有目的蛋白条带.小鼠抗血清能特异性识别源于gp41 NHR的抗原,效价高达1∶102400,平均效价为1∶51200.结论:改造后的亚单位疫苗能有效激活机体的免疫响应,可用于HIV候选疫苗的研发.
