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新型人白细胞介素-13文献资料
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新型人白细胞介素-13在大肠杆菌中的表达及生物活性分析
目的: 在大肠杆菌中表达人白细胞介素-13的新型拼接体蛋白.方法: 用植物凝集素(PHA)和刀豆凝集素(ConA)共刺激人Jurkat 细胞, 通过半巢式RT-PCR扩增在98位缺失Gln、不含信号肽的人IL-13新拼接体基因, 并克隆入pBV220, 构建pBVIL-13表达载体, 经温度诱导后在大肠杆菌DH5α中表达新型人IL-13蛋白.表达产物经S-200纯化、复性后, 用TF-1细胞进行MTT比色测定其活性.结果: 成功地分离了人IL-13新拼接体基因, 并在大肠杆菌中表达.分离纯化的新型IL-13蛋白, 其比活性为1.6×106 U/mg.结论: 获得具有生物学活性的新型人IL-13细胞因子, 为用其治疗肿瘤和脓毒症提供了新的手段.
关键词： 新型人白细胞介素-13 克隆 原核表达
