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  • 用抗合成多肽抗体分析呼吸道HAdV六邻体保守区抗原表位

    作者:辛若雷;包怡华;张勤;张霆

    目的分析人类腺病毒(HAdV)六邻体保守区氨基酸序列, 合成保守区多肽并制备抗多肽抗体, 以确定型间共同的特异性表位.方法用ClustalX、Antheprot等软件, 对HAdV六邻体进行分析, 确定保守区并分析其抗原性.合成抗原性多肽, 免疫家兔制备抗肽多克隆抗体.用间接免疫荧光法和Western blot法, 检测所制备的抗肽抗体与病毒抗原的反应性.结果根据HAdV-2六邻体的保守区合成9种肽段, 分成3组免疫家兔, 共获得3组抗肽抗体.所有的抗肽抗体在1∶ 1 000稀释度时, 与3个型别的HAdV感染细胞裂解物中相对分子质量(Mr)约为116 000的六邻体亚单位具有特异性反应.抗肽抗体对HAdV感染细胞有特征性荧光染色.3组抗肽抗体中, 有7个抗体与3个型别的HAdV感染细胞均具有阳性染色反应. 结论合成的保守区多肽能够诱导抗肽抗体产生, 诱导产生的抗体与HAdV-3、-4、-7具有免疫反应性.通过分析预测抗原表位并制备抗肽抗体是可行的.

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