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HBV/HEV融合二价抗原原核表达载体的构建及蛋白的初步表达
目的:构建一个能够表达出乙/戊型肝炎二价抗原的重组原核表达载体,并在E. coli BL21(DE3)中表达.方法:采用PCR方法扩增出HBV的S基因和HEV的ORF2编码区的羧基末端中的414~606 aa的基因片段,将两片段连接后克隆入T载体,得到融合基因,将融合基因克隆入含有Ω增强子的pTΩ-TE高效的原核表达载体中,构建重组质粒pTΩ-TTSE.将pTΩ-T7SE转化E. coli BL21(DE3),经IPTG诱导后用Western blot鉴定融合蛋白.结果:获得全长为1 284 bp的融合的HBV/HEV的基因片段.已构建的重组质粒pTΩ-T7SE转化E.coli BL21(DE3)后,经IPTG诱导,表达出相对分子质量(Mr)约为50 000重组蛋白.SDS-PAGE分析显示,表达的蛋白主要以不溶性包涵体的形式存在于胞质中,表达量约占全菌蛋白的30.52%.Western blot结果表明在Mr为50 000处可见特异性着色带.结论:成功构建了原核表达载体pTΩ-T7SE,并表达出目的蛋白,为研制预防乙型和戊型肝炎双价疫苗提供了实验技术基础.
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由大肠杆菌制备的人乳头瘤病毒(16型和18型)二价疫苗的免疫原性和安全性:Ⅱ期临床试验
该研究旨在探讨由大肠杆菌制备的新型人乳头瘤病毒16型和18型二价疫苗的剂量、免疫原性和安全性。
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评估HP V疫苗接种在德国的长期影响
在德国,疫苗接种常务委员会( STIKO )已于2007年3月建议12~17岁的女孩接种疫苗预防致癌的HP V16/18型。我们为人乳头瘤病毒感染的自然史和传播建立了一个动态数学模型来评估接种对宫颈癌发病率和死亡率及其前期,以及肛门生殖器疣的影响。我们专注于对自然史模型各个阶段的流行病学数据进行广泛的模型校准,以及对德国宫颈癌筛查的方式具体执行。我们的模型预测:首先在未来30年中,宫颈癌的发病率和死亡率将大幅减少,这主要是由于20世纪90年代增加了筛选对象的参与而不是接种HP V疫苗,紧接着由于接种疫苗而使发病率和死亡率进一步降低。在接下来的100年里,即使疫苗接种率只有50%(正如目前在德国观察到的),HPV疫苗将预防大约37%的子宫颈癌病例。在我们的模型中考虑交叉保护效果,二价疫苗进一步减少所有宫颈癌病例约为7%,四价疫苗约5%。如果中度至高度的疫苗接种覆盖率在女孩中没有实现,男孩接种疫苗是唯一合理的。德国应该实施策略以增加HP V疫苗接种在女童中的覆盖率,从而更好地利用疫苗已经证实的益处。