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人层粘连蛋白受体前体蛋白文献资料
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利用聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化的微量蛋白制备抗血清
目的以SDS-PAGE纯化的微量蛋白制备抗人层粘连蛋白受体前体蛋白(LRP)的血清.方法以SDS-PAGE分离纯化原核表达的人LRP与6×组氨酸的融合蛋白, 切下并粉碎融合蛋白所在凝胶块.将含10 μg融合蛋白的凝胶颗粒与弗氏佐剂混匀后, 免疫BALB/c小鼠.以Western blot检测所获抗血清的滴度和特异性.结果以胃癌细胞总蛋白为靶抗原时, Western blot显示, 所获抗血清仅识别1条Mr约42 000的蛋白带, 将抗血清做1∶ 2 000稀释后, 仍能清晰地显示其靶抗原所在位置.结论以聚丙烯酰胺凝胶颗粒为载体, 用微量蛋白即可成功地制备抗血清.
关键词: 抗血清 SDS-PAGE 人层粘连蛋白受体前体蛋白