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神经生长因子4文献资料
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NT4-TAT-His-PR39融合基因cDNA的构建及意义
目的:探讨PR39对急性缺血心肌的保护作用,构建可分泌表达PR39的神经生长因子4(NT4)-TAT-His-PR39融合基因cDNA.方法:采用互为模板、引物的PCR技术,制备两端含有酶切位点的PR39 cDNA片段.通过常规分子生物学方法,将其与编码NT4信号肽及引导肽、TAT及6×His基因序列用T4 DNA连接酶相连,将NT4-TAT-His-PR39装入质粒pBV220中.结果:融合基因NT4-TAT-His-PR39的长度为421 bp,限制性内切酶切图谱显示,目的带的大小略超过marker的400 bp的位置,证实已经成功地将PR39 cDNA重组到NT4-TAT-His序列的下游.基因测序结果及DNAsis软件分析结果表明,NT4-TAT-His-PR39的全序列与实验设计的序列完全一致.结论:成功地构建能分泌表达PR39、并具穿膜功能和标签的融合基因NT4-TAT-His-PR39.
