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牙髓卟啉单胞菌超声提取物对成骨细胞周期和凋亡的影响
目的：观察牙髓卟啉单胞菌超声提取物对成骨细胞周期和凋亡的影响。方法：用不同浓度牙髓卟啉单胞菌超声提取物（1、10、100μg／ml）作用成骨细胞，MTT法检测细胞增殖情况，流式细胞仪分析细胞周期分布和凋亡变化。结果：牙髓卟啉单胞菌超声提取物显著抑制成骨细胞的增殖。且在一定时间和浓度范围内具有浓度和时间依赖性。10μg／ml和100μg／ml提取物作用24 h时，处于G1期的成骨细胞明显增多；在作用48 h时，牙髓卟啉单胞菌提取物以浓度依赖方式促进成骨细胞凋亡。结论：牙髓卟啉单胞菌超声提取物可阻滞细胞于G1期，并诱导细胞凋亡，抑制成骨细胞增殖。
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变形链球菌超声提取物对牙髓细胞增殖和天然免疫受体基因mRNA表达的影响
目的:观察变形链球菌超声提取物对牙髓细胞的增殖活性、天然免疫受体基因mRNA表达的影响.方法:采用组织块法原代培养牙髓细胞,通过不同浓度的变形链球菌超声提取物(1、10、100μg/ml)作用于牙髓细胞,MTT法检测牙髓细胞的增殖活性;荧光定量PER检测牙髓细胞NOD2、TLR2和TLR4 mRNA的表达水平.结果:1μg/ml变形链球菌超声提取物处理24 h可促进牙髓细胞的增殖;10μg/ml和100μg/ml处理24 h和48 h可明显抑制细胞增殖.变形链球菌超声提取物(10μg/ml)作用于牙髓细胞后,NOD2、TLR2和TLR4 mRNA表达量均增加.结论:变形链球菌超声提取物可抑制牙髓细胞的生长,促进NOD2、TLR2和TLR4 mRNA的表达.
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牙髓卟啉单胞菌促成骨细胞凋亡的机制初探
目的：观察牙髓卟啉单胞菌超声提取物对成骨细胞凋亡的促进作用，并初步探讨其相关分子机制。方法：用浓度为1、10、100μg/mL牙髓卟啉单胞菌超声提取物作用于成骨细胞，分别采用Hoechst33258染色法观察细胞的形态变化；比色法检测细胞中的Caspase－3酶活性改变；同时通过Caspase抑制剂阻断实验分析相关成骨细胞的凋亡途径。结果：牙髓卟啉单胞菌超声提取物能使成骨细胞形态出现染色质浓缩、碎裂等典型的凋亡改变，并可显著提高成骨细胞的Caspase－3酶活性，且具有浓度依赖性（P＜0．05）；Caspase－8抑制剂和Caspase－9抑制剂可以部分抑制牙髓卟啉单胞菌提取物对成骨细胞的促凋亡作用，而Caspase－3抑制剂则能完全阻断牙髓卟啉单胞菌对成骨细胞的促凋亡作用。结论：牙髓卟啉单胞菌超声提取物具有促成骨细胞凋亡的作用，细胞内、外凋亡途径都参与了该过程，并且是一种依赖Caspase－3的凋亡通路。
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人牙龈卟啉单胞菌超声提取物对人牙龈成纤维细胞的影响研究
目的:研究牙龈卟啉单胞菌(porphyromonas gingivalis,P.g)超声提取物对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)的生物学活性以及黏附分子表达水平的影响.方法:使用P.g超声提取物诱导刺激人牙龈成纤维细胞,使用MTT法检测HGFs活性,后用Western blot法检测细胞间黏附分子(intercellular adhesion molecule,ICAM)-1以及血管细胞黏附分子(vascularcell adhesion molecule,VCAM)-1的蛋白表达水平,同时用逆转录多聚酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测黏附分子的mRNA表达水平.结果:使用P.g超声提取物诱导刺激后,HGFs细胞活性受到明显抑制,且具有显著的浓度、时间依赖性.HGFs的黏附分子ICAM-1和VCAM-1的蛋白及mRNA表达水平均显著增强.结论:P.g超声提取物可以抑制HGFs细胞活性,同时增强黏附分子的表达水平,在牙周炎症的发生发展过程中起重要作用.
