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含纳米银的胶原蛋白-丝素蛋白支架对大鼠全层皮肤缺损创面真皮再生的影响
目的 探讨含纳米银的胶原蛋白-丝素蛋白支架对大鼠全层皮肤缺损创面真皮再生的影响. 方法 采用冷冻干燥法分别制备81个含纳米银的胶原蛋白-丝素蛋白支架(纳米银质量浓度为10 mg/L)及81个不含纳米银的胶原蛋白-丝素蛋白支架,分别归为纳米银支架组和对照支架组.每组取9个支架加入人Fb培养,于培养2、12、24 h每组取3孔支架,计数2组支架区域黏附人Fb.于36只SD大鼠背部各制作4个全层皮肤缺损创面,将大鼠按随机数字表法平均分为纳米银支架组和对照支架组,创面分别移植含纳米银的胶原蛋白-丝素蛋白支架和不含纳米银的胶原蛋白-丝素蛋白支架.于术后1、2、4周,每组分别取6只大鼠处死,对创面进行大体观察,HE染色观察组织结构、炎性细胞浸润及胶原沉积情况,免疫组织化学染色观察计数CD68阳性细胞,实时荧光定量RT-PCR法检测创面IL-6和IL-10的mRNA表达.对数据行析因设计方差分析、t检验及Bonferroni校正.结果 (1)培养2、12、24 h,纳米银支架组和对照支架组支架区域人Fb黏附数量相近(t值为1.77～2.60,P值均大于0.05).(2)术后1周,纳米银支架组大鼠创面及创缘未见明显感染迹象,支架血管化明显;对照支架组大鼠创面出现明显感染迹象,小部分支架脱落.术后2周,纳米银支架组大鼠创面移植支架与创面贴附牢固;对照支架组大鼠创面挛缩明显,大部分支架已脱落.术后4周,纳米银支架组大鼠创面移植支架已成功覆盖创面,支架表面已明显上皮化;对照支架组大鼠创面移植支架完全脱落,残余创面明显收缩.(3)术后1、2周,与对照支架组比较,纳米银支架组大鼠创面胶原分泌及组织再生更多,支架内部炎性细胞浸润较少.术后4周,纳米银支架组大鼠创面已明显上皮化;而对照支架组大鼠创面仍有炎性细胞浸润,未见明显上皮化.(4)术后1周,纳米银支架组大鼠创面CD68阳性细胞数为(54±10)个/mm2,与对照支架组的(78±7)个/mm2无明显差异(t =1.52,P＞0.05).术后2、4周,纳米银支架组大鼠创面CD68阳性细胞数分别为(154±10)、(77 ±7)个/mm2,均明显少于对照支架组的(268±16)、(136±13)个/mm2(t值分别为7.31和3.83,P值均小于0.01).(5)除术后4周(f=1.23,P＞0.05)外,术后1、2周纳米银支架组大鼠创面IL-6的mRNA表达量均明显低于对照支架组(t值分别为13.12和4.65,P值均小于0.01).除术后1周(t=3.08,P ＜0.05)外,术后2、4周2组大鼠创面IL-10的mRNA表达量均相近(t值分别为2.14和0.49,P值均大于0.05). 结论 含纳米银的胶原蛋白-丝素蛋白支架不仅具有良好的生物相容性,同时具有明显的炎症调节作用,可加快胶原蛋白-丝素蛋白支架诱导真皮再生,促进创面修复.
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细胞外基质成分及空间形态结构对成纤维细胞生物学行为的影响
成纤维细胞(Fb)是烧(创)伤创面愈合中的主要修复细胞,它通过迁移、增殖、分化、分泌胶原等细胞外基质(ECM)成分,与多种细胞因子及细胞共同起修复作用.Yannas[1] 的研究结果表明,脱细胞真皮再生模板植入真皮缺损创面,创面收缩受到强烈抑制,皮肤经历一种再生型的愈合;推测其机制可能是脱细胞真皮再生模板植入创面后,真皮基质可诱导Fb的长入,合成和分泌具有正常结构的胶原纤维,减少Fb向肌成纤维细胞(MFb)分化.Livesey等[2]证实,真皮基质可以作为真皮重建的模板,为Fb的浸润以及胶原纤维排列提供支架,进而利于真皮组织的再生,减少瘢痕形成.是真皮的成分或空间结构还是两者均对Fb的生物学行为产生影响,其机制目前尚未完全阐明.
