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6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺活化环氨基甲酸酯文献资料
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柱前衍生化HPLC法同时测定龟甲胶中14种水解氨基酸含量
目的:建立一种利用HPLC法同时测定龟甲胶中14种氨基酸的含量.方法:样品以6 mol·L.盐酸于110℃水解7h,以6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺活化环氨基甲酸酯(AQC)进行衍生化反应,采用Kromasil C18色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm),柱温37℃,以0.14 mol·L-1三水合乙酸钠(pH 4.85)为流动相A,60％乙腈为流动相B,梯度洗脱,流速1.4 mL·min-,检测波长248 nm.结果:在一定的浓度范围内,各种氨基酸峰面积和浓度呈良好的线性关系,r值均大于0.999 0;加样回收率(n=9)为94.5％～103.6％;不同样品中14种氨基酸含量范围分别为羟脯氨酸7.08％～8.22％、谷氨酸5.94％ ～8.21％、丝氨酸2.48％～3.12％、组氨酸0.25％ ～0.44％、甘氨酸14.35％ ～ 16.86％、精氨酸4.78％～5.76％、苏氨酸1.24％ ～ 1.75％、丙氨酸4.65％ ～6.56％、脯氨酸6.78％ ～8.83％、酪氨酸0.55％ ～0.84％、缬氨酸0.95％～1.40％、异亮氨酸0.70％～0.95％、亮氨酸1.59％～2.06％、苯丙氨酸1.35％～1.57％.结论:该方法准确、可靠,具有良好的重复性和稳定性,可用于龟甲胶中羟脯氨酸、谷氨酸、丝氨酸、组氨酸、甘氨酸、精氨酸、苏氨酸、丙氨酸、脯氨酸、酪氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸的检测.
