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聚乙二醇化尿酸氧化酶文献资料
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聚乙二醇(PEG)化尿酸氧化酶中游离PEG的含量测定
目的:比较并建立PEG化尿酸氧化酶中游离PEG的测定方法.方法:采用反相高效液相色谱-蒸发光散射检测器(ELSD)联用法和SDS-PAGE碘染的方法.RP-HPLC法的色谱柱为C4柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相A为0.1％(v/v)的三氟乙酸-水,流动相B为0.1％(v/v)的三氟乙酸-乙腈,梯度洗脱;流速为1.0 mL·min-1;柱温30℃;SDS-PAGE碘染采用氯化钡固定,碘-碘化钾染色.结果:RP-HPLC法中,PEG的检测灵敏度为0.2μg,PEG在1～6μg范围内呈良好的二项式回归关系(R2=0.9993).低、中、高3个浓度的加样回收率分别为96.2％、97.4％、96.8％.SDS-PAGE碘染法灵敏度为0.1 μg.结论:建立的高效液相色谱-蒸发光散射检测器联用法与SDS-PAGE碘染法均可对游离PEG进行测定.前者测定结果准确,重复性好,可用于PEG的精确定量分析,后者操作简单,不需要特殊仪器,但只可用于限度检查.
