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nm23-H1基因调控人高转移大细胞肺癌细胞株L9981的PKA活性和体外增殖侵袭力的实验研究
目的 探讨nm23-H1基因转染对人高转移大细胞肺癌L9981细胞株PKA活性变化和细胞增殖和体外侵袭力影响.方法 应用放免法检测人高转移大细胞肺癌原代细胞株L9981,转基因细胞株L9981-nm23-H1和空载体转染细胞株L9981-pLXSN的PKA的活性,应用MTT法检测L9981,L9981-nm23-H1和L9981-pLXSN细胞株的体外增殖,改良的Boyden小实法检测L9981,L9981-pLXSN,L9981-nm23-H1这3个细胞株细胞体外侵袭力.结果 (1)原代细胞株L9981的PKA活性为0.408±0.048(pmol/min/μg),空载体转染细胞株L9981-pLXSN的PKA活性为0.476±0.057(pmolmin/μg),转基因细胞株L9981-nm23-H1的PKA活性为1.939±0.062(pmol/min/μg),经F检验,在3种细胞株中PKA活性有显著性差异(P＜0.001)两两比较,L9981-nm23-H1的PKA的活性明显高于L9981和L9981-pLXSN细胞株(P＜0.001),而L9981和L9981-pLXSN细胞株之间所显示PKA的活性并无统计学差异(P＞0.05);(2)L9981细胞株的OD值为1.532±0.893,L9981-pXSN细胞株的OD值为1.435±0.542,L9981-nm23-H1细胞株的OD值为0.456±0.081,经F检验,L9981、L9981-pLXSN和L9981-nm23-H1增殖力有非常显著性差异(P＜0.001),两两比较,L9981-nm23-H1细胞增殖力显著低于L9981和L9981-pLXSN细胞株(P＜0.001),而L9981和L9981-pLXSN细胞株之间比较无显著性差异(P=0.121＜0.05);(3)L9981细胞株穿越ECM胶的细胞数为151.75±3.304,L9981-pLXSN细胞株穿越ECM胶的细胞数为158.75±2.986,L9981-nm23-H1细胞株穿越ECM胶的细胞数为43.5±2.082,经F检验3个细胞株间的体外侵袭力有显著性差异,两两比较,L9981-nm23-H1细胞株体外侵袭力明显低于L9981和L9981-pLXSN细胞株(P＜0.001),而L9981和L9981-pLXSN细胞株间比较无显著性差异(P=0.271＜0.05).结论 nm23-H1基因可以显著抑制人高转移大细胞肺癌的体外增殖力和侵袭力,显著上调人高转移大细胞肺癌细胞株的PKA活性信号.
