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1,4-苯醌致人胚肺成纤维细胞的凋亡效应与调控机制
目的:研究1,4-苯醌(1,4-benzoquinone,PBQ)对人胚肺成纤维细胞(human embryonic lung fibroblast,HELF)的凋亡效应与调控机制.方法:分别用不同浓度(10、20、40、60、80μmol/L)的PBQ处理HELF细胞24 h和40μmol/L pBQ处理HELF细胞24、48、72 h后,应用噻唑蓝(MTT)比色法检测PBQ对HELF细胞增殖的抑制作用,以PI单染法检测细胞周期的改变,用Annexin-V/PI双染法检测细胞凋亡,以实时荧光PCR法检测Bax、Bcl-2、p53 mRNA表达水平的改变.结果:与对照组相比,不同PBQ染毒浓度下作用24 h后,随PBQ浓度增加,细胞相对增殖率显著下降(P＜0.05),G0/G1期细胞下降(在40和60μmol/L时,P＜0.05),S期细胞增加(P＜0.05),以40 μmol/L PBQ浓度作用于HELF细胞不同时间,随着染毒时间的增加其相对增殖率和S期细胞均下降(P＜0.05),而G0/G1期细胞随着染毒时间的增加呈上升趋势(P＜0.05)；当染毒浓度大于20 μmol/L时,染毒24 h可诱导HELF细胞产生凋亡,凋亡率随着染毒时间的增加而上升,与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05)；不同浓度的PBQ染毒24h,细胞的Bax、Bcl-2、p53 mRNA表达水平均上调.40μmol/L PBQ作用不同时间后,Bax、p53 mRNA水平随着染毒时间的增加而上升,与对照组相比差异均具有统计学意义(P均＜0.05); Bcl-2随染毒时间增加而下降,48和72 h时与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05)；Bax/Bcl-2比值随染毒时间增加而增加,与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:PBQ能抑制HELF细胞增殖,影响HELF细胞周期分布,诱导细胞发生凋亡,其凋亡机制可能与Bax/Bcl-2比值的上升,及p53 mRNA表达的上调有关.
