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Ni2+-金属鏊合层析文献资料
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NGAL蛋白Ni2+-金属鏊合层析纯化及其鉴定
背景与目的:通过对新癌基因NGAL的原核融合表达产物进行Ni2+-金属鏊合层析纯化及其MALDI-TOF-MS鉴定,后获得一定丰度与纯度的NGAL蛋白.材料与方法:将pDsbA2.0-NGAL融合表达载体转化大肠杆菌,进行IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达产物的产量与可溶性,然后将表达产物进行Ni2+-金属鏊合层析纯化及其MALDI-TOF-MS鉴定.结果:将pDs-bA2.0-NGAL融合表达载体进行IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析显示表达的NGAL融合蛋白产量高、可溶性好;对表达的NGAL蛋白进行Ni2+-金属鏊合层析纯化后其纯度＞95%,MALDI-TOF-MS鉴定结果提示纯化后NGAL蛋白分子量与其理论分子量的误差仅为0.91‰.结论:通过对新癌基因NGAL的原核融合表达产物进行Ni2+-金属鏊合层析纯化及其MALDI-TOF-MS鉴定,后确切获得了一定丰度电泳纯的NGAL蛋白,这为下一步制备其抗体奠定了良好的实验材料.
关键词： NGAL Ni2+-金属鏊合层析 6×His MALDI-TOF-MS
