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  • Xpert MTB/RIF技术用于结核分枝杆菌联合检测的研究

    作者:纪丽微;林健雄;彭东东;李耿聪;蓝邦阳

    目的 评价Xpert MTB/RIF用于结核分枝杆菌联合检测的临床价值.方法 收集汕头市2015年1月至2016年4月2 284例疑似结核病患者标本,应用离心浓缩涂片法、BACTEC MGIT-960液体培养法、结核分枝杆菌DNA荧光定量法(TB-DNA)、结核杆菌RNA恒温扩增检测(SAT TB-RNA)、Xpert MTB/RIF技术分别进行检测,Xpert MTB/RIF利福平耐药结果与线性探针结核分枝杆菌耐药快速检测系统(HAIN)检测结果比较.结果 2 284例患者中1 097例为活动性结核病患者、1 187例为非结核患者,Xpert MTB/RIF阳性检出率高,与离心浓缩涂片、BACTEC MGIT-960液体培养、TB-DNA、SAT TB-RNA比较差异均有统计学意义(χ2=31.23,P<0.01;χ2=4.94,P<0.05;χ2=6.15,P<0.05;χ2=41.77,P<0.01);Xpert Mtb/RIF法敏感性[50.14%(550/1 097)]和特异性[100.00%(1 187/1 187)],高于TB-DNA+SAT TB-RNA联合检测的45.49%(499/1 097)、97.98%(1 163/1 187),二者比较差异有统计学意义(χ2=4.75,P<0.05;χ2=24.25,P<0.01).以HAIN检测结果为金标准,Xpert Mtb/RIF检测RIF耐药的敏感性为100.00%(60/60),特异性为99.52%(418/420),两种方法具有较好的一致性(Kappa=0.98).结论 Xpert MTB/RIF敏感性和特异性高,可用于取代TB-DNA+SAT TB-RNA+HAIN与离心浓缩涂片法、BACTEC MGIT-960液体培养及一二线药敏试验组成结核分枝杆菌联合检测,既能在2 h内报告结核分枝杆菌及利福平耐药结果,又能在后续培养出结核分枝杆菌进行一二线药敏试验供临床调整治疗方案,操作更加简便快速且易于开展,对结核病和耐多药结核病的快速诊断具有极高的应用价值.

  • 重庆地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌主要流行克隆更替的机制研究

    作者:尚伟龙;胡启文;胡珍;朱军民;杨杰;袁文常;程航;袁吉振;张霞

    目的 探讨重庆地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株ST239-MRSA-Ⅲ-t030替代ST239-MRSA-Ⅲ-t037克隆的机制.方法 选择重庆地区分离的ST239-MRSA-Ⅲ-t030和ST239-MRSA-Ⅲ-t037临床株,检测各菌株的生长曲线,观察菌落形态,分析菌株的药物敏感谱;再通过体外、体内竞争实验和交叉抑制实验深入探讨ST239-MRSA-Ⅲ-t030替代ST239-MRSA-Ⅲ-t037的机制.结果 ST239-MRSA-Ⅲ-t030菌株较ST239-MRSA-Ⅲ-t037有更短的生长迟缓期,后者在固体培养基上生长的菌落相对较小,且都对复方新诺明耐药,对利福平敏感,这与ST239-MRSA-Ⅲ-t030菌株不同(大多数对复方新诺明敏感,对利福平都耐药).ST239-MRSA-Ⅲ-t030菌株在体外和体内都表现出比ST239-MRSA-Ⅲ-t037菌株更强的生存竞争优势,但两克隆的菌株间并不存在明显的交叉抑制现象.结论 ST239-MRSA-Ⅲ-t030克隆的生存竞争优势和独特的耐药表型可能是其成功替代ST239-MRSA-Ⅲ-t037而成为第一流行克隆的原因.

  • 肺结核与结核性脑膜炎病例中结核分枝杆菌耐利福平相关基因突变分布分析

    作者:石晓丹;张晨;周杨;赵钢;马学军

    目的 分析结核性脑膜炎与肺结核病例中,导致结核分枝杆菌利福平耐药的rpoB基因突变分布规律及差异.方法 对包含利福平耐药决定区81bp的102株结核分枝杆菌临床分离株的PCR产物进行测序分析.结果 102株利福平耐药的结核分枝杆菌的rpoB基因测序发现,63株导致肺结核的结核分枝杆菌的rpoB基因突变常见位点为:531 (53.97%),526(20.63%),516(6.45%).39株导致结核性脑脑膜炎的rpoB基因突变常见位点为:531 (61.54%),526(20.51%),533(7.69%).结论 导致结核性脑膜炎与导致肺结核的结核分枝杆菌耐利福平rpoB基因的常见两个突变位点(531和526)无显著差异.其中531位密码子的Ser-Leu突变率占明显优势.

  • Xpert MTB/RIF试验检测结核分枝杆菌及其耐药性研究

    作者:刘慧梅;颜学兵

    目的 探讨利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术(Xpert MTB/RIF)在检测结核分枝杆菌(M.tubercutosis,MTB)及其利福平耐药性方面的应用价值.方法 收集151例疑似结核患者标本,分别进行液体变色培养基培养、涂片镜检、传统比例法药敏试验以及Xpert MTB/RIF试验检测,分析Xpert MTB/RIF试验检测MTB及其耐药性的敏感度和特异度.结果 以液体变色培养基培养试验作为金标准,Xpert MTB/RIF试验检测MTB的敏感度和特异度分别为75.8%(25/33)和79.7%(94/118),两者一致性好(K=0.472).以传统比例法药敏试验为金标准,Xpert MTB/RIF试验检测利福平耐药的敏感度和特异度分别为80.0%(4/5)和89.3%(25/28),两者一致性好(K=o.595).结论 Xpert MTB/RIF试验检测MTB及其耐药性具有较高的灵敏度和特异度.

  • Xpert MTB/RIF 系统快速检测结核分枝杆菌及利福平耐药性研究

    作者:伊惠霞;侯新月;王泉;刘玉梅

    目的:探讨 Xpert MTB/RIF 快速检测系统在结核病诊断及利福平耐药性检测中的价值。方法收集2012年12月-2013年12月在新疆医科大学第一附属医院和乌鲁木齐市胸科医院住院的疑似肺结核患者312例的痰液标本,同时进行涂片抗酸杆菌检查和用罗氏固体培养基进行结核杆菌培养,用比例法进行药物敏感性试验,并用 Xpert MTB/RIF 系统进行结核分枝杆菌 DNA 及利福平耐药性检测,结果312例痰液标本中,涂片和培养均阳性的124例患者 XpertMTB/RIF 检测的敏感度为94.3%(117/124),涂片阴性而培养阳性者的敏感度为92.8%(26/28),涂片阴性而符合临床标准者 XpertMTB/RIF 检测的敏感度为47.6%(10/21),与培养结果比较, XpertMTB/RIF 检测的总敏感度为94.1%(143/152);增加检测的次数(2次检测)可将灵敏度提高到98.7%%;对非结核病患者 XpertMTB/RIF 检测的特异度为99.3%(138/139)。与比例法相比,Xpert MTB/RIF 检测利福平耐药的灵敏度为90.9%(10/11),特异度为99.3%(140/141)。除涂片阴性者外,Xpert MTB/RIF 半定量检测结果与涂片结果有较好的一致性。结论Xpert MTB/RIF 系统检测结核分枝杆菌及利福平耐药性具有较高的临床应用价值,且方法简便、快速。

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