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血清杀菌试验和酶联免疫吸附试验测定C群脑膜炎奈瑟菌血清抗体滴度比较
目的 比较血清杀菌试验(SBA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)测定两种C群脑膜炎奈瑟菌(Nm)疫苗免疫后血清抗体滴度的差异.方法 采用SBA测定75名未免疫健康成年人(40～70岁)血清、143名3～8月龄婴儿及194名3～5岁儿童NmA和C群结合疫苗或A+C群多糖疫苗免疫前后血清中Nm杀菌抗体水平,然后用ELISA测定相应血清的Nm特异性IgG含量,并利用线性相关与回归分析两种测定结果的相关性.结果 未免疫健康成年人血清中Nm杀菌抗体水平和特异性IgG含量之间的相关性较高(r=0.814 33,P＜0.001)；3～8月龄婴儿和3～5岁儿童接种结合/多糖疫苗前,Nm杀菌抗体水平和特异性IgG含量之间相关性较差(3～8月龄:r=0.140 64,P＞0.l00/r=0.2899,P＜0.05;3 ～5岁:r=0.540 40,P＜0.05/r=0194 36,P＜0.05),接种1剂结合疫苗后,杀菌抗体水平和特异性IgG含量之间的相关性较好(r=0.809 38,P＜0.001和r=0.837 23,P＜0.001)；接种多糖疫苗后,杀菌抗体水平和特异性IgG含量之间的相关性较差(r＜0.500 00).结论 健康成年人血清和结合疫苗免疫后的婴幼儿血清中特异性C群Nm IgG含量可以间接反映血清杀菌抗体水平,ELISA方法可以替代SBA.但ELISA检测方法不适用于3～8月龄婴儿多糖疫苗免疫后的效果评价.
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人脑膜炎球菌参考血清 Men10的制备及其抗A、C、Y、W135群脑膜炎血清群荚膜多糖抗体IgG含量和体外杀菌试验滴度
目的：制备人脑膜炎球菌参考血清，对其中A、C、Y、W135血清群的抗荚膜多糖抗体IgG含量和体外杀菌试验（ serum bactericidal assay ， SBA）滴度进行定值。方法用4价A、C、Y、W135群脑膜炎荚膜多糖疫苗免疫20名健康成人，采集免疫后的血浆进行混合、去纤维蛋白原、过滤、分装、冻干，得到人脑膜炎球菌参考血清Men10。在兰州生物制品研究所有限责任公司（ LIBP ）实验室，用标准检测人血清中抗脑膜炎球菌荚膜多糖抗体IgG定量ELISA方法，以国际标准血清CDC1992为标准，对其中4个血清群抗荚膜多糖抗体IgG含量定值；以临时定值的Men10和CDC1992分别为标准检测12份美国疾病预防控制中心（ CDC）的校正血清、56份4价多糖疫苗免疫后的血清，通过比较对定值的准确性进一步验证。同时以体外杀菌试验测定针对4个血清群的SBA滴度。结果制备了4000支（0．5 ml/支）冻干人脑膜炎球菌参考血清Men10。该血清HBV、HCV、HIV、梅毒螺旋体检测均阴性，残留水分含量2．3％。以Men10为标准检测的12份CDC校正血清和56份4价多糖疫苗免疫后的血清群抗荚膜多糖抗体结果，与以CDC1992为标准检测的结果均具有良好的直线相关关系（ r＝0．99，P＜0．05）；以Men10为标准检测的CDC1992的4个血清群抗荚膜多糖抗体的新值与其原定值比较，各血清型的误差均＜10％。同时确立了Men10中各血清群的体外杀菌试验滴度。结论 LIBP成功制备了人脑膜炎球菌参考血清Men10并完成了对其中的4个血清群抗荚膜多糖抗体IgG含量的准确定值，并确定了其中各群别抗体的体外杀菌试验滴度。
关键词： 人脑膜炎球菌参考血清 抗体含量 酶联免疫吸附试验 血清杀菌试验 -
伤寒杆菌耐药质粒pRST98介导血清杀菌作用抗性的研究
将pRST98导入不含质粒且对抗菌药物敏感的大肠杆菌、伤寒杆菌,并用十二烷基硫酸钠(SDS)消除耐药菌株的pRST98,计算接合子及R质粒消除前后菌株在人、兔及豚鼠的不同浓度、不同成份血清中的存活率.pRST98介导其宿主菌对血清杀菌的抗性,但在不同宿主菌中抵抗力不同;补体经典途径及旁路途径均参与血清杀菌过程.pRST98具有多效性,其广泛的宿主性在介导细菌多重耐药的同时,还赋予细菌抵抗血清的杀菌作用,使病原菌致病性增强.
关键词： 伤寒杆菌 耐药质粒pRST98 血清杀菌试验 -
婴儿重症肺炎并心力衰竭148例病原学分析
目的 了解青岛市儿童医院重症监护病房(ICU)重症肺炎的病原学分布及其对药物的敏感性.方法 2005年3月～2007年3月,我院ICU收治符合1987年小儿肺炎防治方案诊断标准的重症肺炎并心力衰竭婴儿共148例,对其痰液做细菌学检测,咽拭子标本行肺炎支原体PCR检测,试验方法严格按照美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)新标准进行.结果 革兰阴性细菌是本组婴儿重症肺炎并心力衰竭的主要致病菌,其中大肠埃希菌常见(25.49%),肺炎链球菌次之(17.64%),之后依次是铜绿假单胞菌(14.71%),金黄色葡萄球菌(9.80%),臭鼻克雷伯菌(8.82%)等;检出细菌并白色念珠菌感染者3例,单纯支原体感染者3例,细菌并支原体感染者8例.婴儿重症肺炎分离的病原菌对青霉素类和第一、二代头孢菌素类抗生素耐药率高,且多重耐药现象严重,其对耐酶的第三代头孢菌素保持高度的敏感性.结论 治疗婴儿重症肺炎并急性心力衰竭时应联合用药.同时监测本地区婴儿重症肺炎的病原学流行分布及药物敏感性变化非常重要.
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脑膜炎四价结合疫苗接种后C群抗体应答的持久性
C群脑膜炎球菌（ MenC ）病在美国占到所有脑膜炎球菌病的三分之一，常引起脑膜炎球菌病的暴发。其与白喉类毒素相结合的四价结合苗（ MenA-CYWD ）2005年被推荐用于青年人和部队新兵这样的高危人群。作者评估了MenACYWD 或脑膜炎球菌多糖疫苗（ MP SV4）接种的美国部队人员中抗MenC抗体的持久性。从国防医学监测系统中随机地选用了1200名2006年到2008年间的MenACY-WD 接种者或2002年到2004年间的MPSV4接种者。对所有选用对象评估了其对Men C 的基线血清学应答；每疫苗组中有100名在接种后6个时点进行了检测：5～7，11～13，13～19，23～25或35～37个月。抗－MenC的几何平均滴度（ GMT）用兔补体血清杀菌试验（ rSBA）测定，几何平均浓度（ GMC）用酶联免疫吸附试验（ ELISA）测定。连续的变化用威尔科特森秩和检验进行比较，rSBA滴度≥8者的比例用卡方检验。接种前 MenACWYD 组的 rSBA GMT＜8，在接种后5～7个月增至703，接种后3年降至43，下降了94％。 MenACWY D 组的GMT在接种后5～7个月显著低于 MPSV4组。 MenACWYD免疫者rSBA滴度≥8的比例在5～7个月为87％，接种后3年降至54％。两疫苗组在各时点rSBA滴度≥8的个体比例方面没有明显差异。 MenACWYD组的基线GMC为0．14μg／mL，接种后5～7月时为1．07μg／mL，3年时为0．66μg／mL，在所有时点都显著低于MPSV4组。抗MenC 的应答在用MenA-CYWD 接种后衰减；为了保持循环抗体的保护水平需要加强剂接种。
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利用血清杀菌试验对伤寒沙门菌 Vi多糖疫苗进行免疫评价
伤寒沙门菌Vi荚膜多糖抗原（ VI-CPS）是对抗伤寒热的有效疫苗。因评估VI-CPS疫苗对伤寒热的保护功效没有可用的动物模型，所以血清杀菌试验（ SBA）是评估其效力所推荐的“金标准”。利用已优化的Gotschlich 法从伤寒沙门菌 Ty6S （ CSBPI-B191）中提取VI-CPS。用纯化的VI-CPS（50μg），肌内注射3组兔子，每组5只，第2组在第15天再注射1剂50μgVI-CPS加强剂量，第3组在第15天和30天分别再注射2剂加强剂量。利用SBA对各组在第0、15、30和45天获得的血清进行了测试。1、2和3组在第15、30和45天时抗-VI-CPS的滴度分别为4、16和16；4、32和32；16、64和64。因此， VI-CPS被证明是一种有效的免疫原，甚至一个剂量的VI-CPS就可以对伤寒沙门菌诱导出高效的杀菌作用。虽然VI-CPS是一种可靠的疫苗，但有时其在纯化过程中的解聚可能会影响其效力，这可通过效力试验解决。因此，世界卫生组织建议的被动血凝试验并不能表明疫苗的效力，我们建议使用SBA来评估VI-CPS的杀菌能力。
