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甲型H1N1流行性感冒病毒血凝素HA1氨基端的表达及双抗体夹心ELISA法的建立
甲型H1N1流行性感冒（简称流感）病毒是一种人类常见的流感病毒之一,2009年引起流感大流行的病毒并非一种全新的流感病毒[1]，陆一涵等[2]推测可能是北美地区的H1N4病毒发生了一定程度的变异（包括重组和重排）所致。基因组测序发现，该病毒包含禽流感、猪流感和人流感3种流感病毒的基因片段[3-4]，其中血凝素(HA)蛋白来源于猪谱系，一直存在于经典猪流感病毒和三源重排子猪流感病毒中[5]。HA蛋白是流感病毒主要的表面抗原，与病毒吸附穿膜及宿主对病毒易感性有关[6-8],其变异率较高，常通过突变使病毒逃脱宿主免疫引起新的流感大流行。这种变异主要体现在HA1氨基端球形头部的受体结合部位与抗原决定簇氨基酸的改变，因此甲型H1N1病毒HA1氨基端蛋白的表达是建立特异性检测方法的关键。笔者通过原核表达此次甲型H1N1流感病毒血凝素HA1氨基端蛋白，制备多抗血清，建立了特异性双抗体夹心ELISA检测法。
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人类新基因era基因组织分布的免疫组织化学研究
目的:为了研究人era基因这一人类新基因表达产物的组织分布情况.方法:根据人era序列设计并合成扩增引物,用PCR法从pUC 19-hera质粒中扩增人era基因(h-era)全长cDNA和h-ERAC端的结构域基因,并分别克隆到(His)6融合表达载体pRSET-C和非融合表达载体pDH中,诱导表达(His)6-h-ERA融合蛋白和h-ERAC端结构域蛋白.用h-ERAC端结构域蛋白免疫新西兰白兔,制备兔抗h-ERA抗血清.用Western-b10t对兔抗h-ERA抗血清.进行了鉴定,并成功地制备了兔抗h-ERA血清.利用在大肠杆菌中高表达、纯化的(His)6-h-ERA融合蛋白,对已制备的兔抗人ERA抗血清进行进一步鉴定纯化获得抗h-ERA的特异性多抗;再对4月～5月人胎儿心、肝、肺、脾、肾等脏器和胃、小肠、睾丸、胸腺、胰脏及胆囊进行免疫组织化学染色.结果:在人类4月～5个月胎儿心、肝、肺、脾、肾脏等脏器和胃、小肠、睾丸中均有免疫反应阳性产物出现.胰脏、心、肺脏等呈高表达,脾脏、胃、小肠呈中等表达,睾丸、肝脏、肾脏呈低表达,胆囊、胸腺无免疫阳性表达产物出现.结论:人ERA在人类正常胎儿不同组织中有表达,但人ERA蛋白在各种组织中分布情况有差异,可能是一种新型功能蛋白.
