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BCR法提取柴油车尾气颗粒物中金属及生物学有效性分析
目的 研究柴油车尾气颗粒物中金属的化学形态,并对各金属进行生物学有效性分析.方法 采用BCR三步萃取法对柴油车排放颗粒物进行连续提取,对颗粒物中含量大的金属Zn,Ba和Ti进行化学形态分析,通过公式计算各金属的生物学有效性系数,根据系数对金属的生物学有效性进行评价.结果 通过BCR连续提取法和消解法分析颗粒物中金属的化学形态,Zn,Ba主要存在于有机物结合态中,Ti主要存在于残渣态中.通过计算,Zn、Ba的生物学有效性系数k所在范围为:0.2＜k＜0.8,存在一定的生物学有效性.Ti的生物学有效性系数k所在范围为:k＜0.2,存在较低的生物学有效性.结论 金属Zn,Ba和Ti在柴油车尾气颗粒物中含量较大,分析其化学形态,其中Ti主要以残渣态存在,Zn,Ba主要以有机物结合态的形态存在.按照生物学有效性系数所在范围得出,Ti存在较低的生物学有效性,Zn、Ba存在一定的生物学有效性.
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人间充质干细胞生物学有效性的质量评价
人间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)是一类存在于不同组织间质或血管周围、形态类似于成纤维细胞的成体干细胞.hMSCs具有独特的、与治疗疾病密切相关的生物学有效性(biological effectiveness),因此已成为临床研究中发展为迅速的一类干细胞.其生物学有效性可归为三大类:多向分化潜能、免疫调控功能和组织再生功能,而每一类别中又含有细化的内容(或质量属性).生物学有效性是临床前研究阶段hMSCs产品综合质量评价的重要内容,而相关质量评价的目的是用于预测或确保相关产品临床治疗有效性的重要依据.由于如何有效预测干细胞临床治疗的有效性是影响其产品研发的重要瓶颈因素,因此对hMSCs“生物学有效性”的评价在其产品研发中变得非常重要.本文首先总结了目前国际上有关hMSCs生物学有效性相关质量属性的共识,进而提出了一些有效评价hMSCs生物学有效性不同方面的评价技术和评价策略,以帮助建立综合性hMSCs生物学有效性质量评价技术体系.
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人间充质干细胞体外成软骨分化能力综合评价策略研究
目的:探索人间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)成软骨细胞诱导分化能力评价技术和评价策略,为hMSCs生物学有效性体外评价提供方法学参考.方法:高密度体外接种hMSCs,促使其形成软骨样3D微球结构,并在此基础上对其成软骨细胞诱导分化能力进行评价.评价内容有:①微球的自发形成能力以及成软骨诱导分化过程中外观形态学分析.②以阿辛蓝及番红O染色为基础的组织结构分析,用于软骨细胞外基质形成能力分析.③通过Real-time PCR对软骨细胞特定基因(ACAN,COL1A2,COL2A1,COL1OA1和MIA)表达水平的分析.在对以上评价结果综合分析和软骨组织学方法验证的基础上,对hMSCs体外成软骨细胞诱导分化能力进行综合准确评价.结果:具备软骨细胞诱导分化能力的hMSCs可表现为:①具有自发形成软骨样细胞微球能力,并在诱导分化过程中形成白色光滑致密软骨样结构,阿辛蓝染色呈深蓝色.②组织学上可观察到细胞微球外周呈同心圆排列的软骨细胞外基质层.(③成软骨诱导分化过程中软骨细胞特定基因表达显著上调.不同hMSCs在上述三方面的综合特性上存在较大差异.结论:对hMSCs成软骨细胞诱导分化过程中的形态学、组织学和特定基因表达水平的检测较单一方法的检测能够更加客观准确地评价hMSCs的成软骨细胞分化能力.
