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藤梨根提取液对小鼠染色体DNA抗诱变作用研究
目的 观察藤梨根提取液对小鼠染色体DNA抗诱变作用.方法 将清洁级昆明小鼠随机分为空白对照组、环磷酰胺组、低剂量Ⅰ组、低剂量Ⅱ组、高剂量Ⅰ组、高剂Ⅱ组6组,分别予蒸馏水、低剂量藤梨根提取液、高剂量藤梨根提取液灌胃;除高剂量Ⅰ组、高剂量Ⅱ组外,于给药第2天予各组小鼠腹腔注射环磷酰胺(cyclophosphamide,CP)诱变,给药第4天处死各组动物.通过小鼠骨髓细胞嗜多染红细胞(polychromatic erythrocyte,PCE)微核(micronucleus,MN)的发生情况,观察藤梨根的抗诱变作用.结果 低、高两种剂量的藤梨根提取液对CP诱发的小鼠MNPCE有明显的抑制作用,低剂量、高剂量组的MN发生率与环磷酰胺组比较差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05).低、高两种剂量的藤梨根提取液均未显示有促进小鼠体内自发MN和有抑制自发MN产生的作用.结论 藤梨根提取液对诱变剂引发DNA的损伤具有抑制作用.
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弓形虫不同株染色体DNA多态性PFGE分析
目的 分析弓形虫不同分离株染色体DNA多态性.方法 采用PFGE技术对弓形虫8个分离株进行分子核型分析.结果 在2.0~6.0Mb范围内分离出7~8条染色体,各株PFGE电泳分子核型大体相似,但部分染色体DNA电泳迁移速度并不一致并存在共迁移现象,8个分离株分为3个类型.结论 弓形虫不同分离株既存在一定的同源性,但同时又显示染色体DNA多态性.这可能同弓形虫不同分离株毒力等生物特性的差异有关.
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脉冲电泳转移膜全染色体杂交--一种新的念珠菌基因型鉴定方法
将8种念珠菌标准株用CHEF电泳技术分离基因组全染色体并进行Southern印迹转移,然后用1株白念珠菌和1株热带念珠菌的全染色体做探针分别与该转移膜杂交,从杂交结果可了解菌种间的亲缘关系,有助于确定其分类学地位.研究表明该方法特异、可靠,可做为一种新的念珠菌基因型鉴定方法.
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一种快速提取丝状真菌产黄青霉DNA的方法
介绍一种快速有效的提取丝状真菌产黄青霉染色体DNA的方法.该方法以100mmol/L Tris、100mmol/L NaCl、50mmol/L EDTA-Na2和2%SDS(pH9.0)为提取液,经石英砂研磨破壁,获得了较高质量的染色体DNA,该法较酶解法和氯化苄法廉价、快速、安全,且不影响其后续的分子生物学操作.
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一种通用的从少量培养液中快速提取细菌染色体DNA的方法
目的建立一种通用、快速、简便的提取细菌染色体DNA的方法.方法用丙酮破坏细菌细胞壁膜脂质结构,裂解液破除细菌细胞膜,释放胞内核酸,经酚/氯仿/异戊醇去除蛋白质及多糖,无水乙醇沉淀DNA,TE缓冲液溶解DNA.结果提取染色体DNA的琼脂糖电泳图谱,对于G-杆菌与经典的CTAB法提取的DNA图谱相同,对于G+球菌其效果要明显好于CTAB法.所得DNA能被HindⅡ酶切消化,能用于RAPD扩增.结论这种提取染色体DNA的新方法,对于所收集的8种不同的细菌都有较好的结果,是一种通用的细菌染色体DNA提取方法.
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辐射诱导酵母细胞延迟的遗传不稳定性
目的: 探讨辐射诱导酵母细胞延迟的遗传不稳定性是否与特定的染色体改变有关,这些克隆是否发生了延迟的染色体内重组频率及延迟的染色体畸变频率的增加,以便帮助鉴别引起遗传不稳定性的基因或外基因子.方法:酵母细胞受不同剂量γ射线照射,采用变交电场凝胶电泳技术,检测了受照细胞第58代克隆体延迟的遗传不稳定性.结果:Rsy-112未受照细胞的重组频率范围为2.7×10{-4}~4.6×10{-4},平均值为3.5×10{-4};受照细胞剂量在0.4 kGy~4.0 kGy之间的重组频率范围为2.8×10{-4}~11.7×10{-4}和3.9×10{-4}~35.3×10{-4},平均值分别为5.9×10{-4}和19.4×10{-4}.结论:辐射能够诱导酵母细胞延迟的遗传不稳定性,克隆细胞出现染色体内重组频率明显增加,核型发生了不同改变,主要为显带丢失、重组、分离及出现新的显带.