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小青龙汤联合玉屏风散对变应性鼻炎大鼠AQP5、NF-κB p65和p-CREB表达的影响
目的：基于 NF-κB 信号通路观察小青龙汤联合玉屏风散对变应性鼻炎( allergic rhinitis,AR)大鼠鼻黏膜AQP5、NF-κB p65和p-CREB表达的影响,揭示小青龙汤联合玉屏风散治疗AR的作用机制及以饮论治AR的合理性。方法将清洁级健康雄性Wistar大鼠48只随机分为6组,即分为正常组、AR模型组、Forskolin干预组、H89干预组、PDTC干预组、小青龙汤联合玉屏风散组,每组8只。采用卵蛋白全身致敏与局部攻击方法制作AR大鼠模型,观察小青龙汤联合玉屏风散组在治疗后鼻黏膜AQP5、NF-κB p65和p-CREB的表达。结果模型组AQP5、p-CREB表达下调；Forskolin干预组、PDTC干预组、小青龙汤联合玉屏风散组均能使AQP5、p-CREB表达上调,而cAMP依赖蛋白激酶(protein kinase A,PKA)抑制剂H89能下调AQP5、p-CREB表达。模型组NF-κB p65表达上调,Forskolin干预组、PDTC干预组、小青龙汤联合玉屏风散组均能使NF-κB p65表达下调,而PKA抑制剂H89能上调NF-κB p65表达。结论小青龙汤联合玉屏风散治疗变应性鼻炎作用机制可能与抑制NF-κB信号通路和兴奋cAMP-PKA信号通路使AQP5表达上调有关,为以饮论治AR奠定了现代生物学基础。
关键词： 变应性鼻炎 小青龙汤 玉屏风散 NF-κB信号通路 cAMP-PKA信号通路 -
基于cAMP-PKA信号通路的虚寒状态大鼠中枢神经递质变化机制研究
目的:探讨虚寒状态下单胺类神经递质的变化及机制,明确cAMP-PKA信号通路在虚寒状态中的作用.方法:氢化可的松塑造大鼠虚寒模型,HPLC法检测脑内单胺类神经递质及代谢产物含量:NE、E、DA、5-HT、5-HIAA、DOPAC,放免法测血浆cAMP、cGMP水平,免疫组化法测肝脏PKA表达.结果:14d虚寒状态组NE、5-HIAA、5-HT含量和cAMP、cGMP水平及PKA表达显著降低;21 d虚寒状态组NE、DOPACT含量和cAMP、cGMP水平及PKA表达显著降低.结论:cAMP-PKA通路可能是介导虚寒状态脑内单胺类神经递质变化的机制之一.
关键词： 虚寒状态 单胺类神经递质 cAMP-PKA信号通路 -
CCR2可能通过cAMP-PKA信号通路参与大鼠炎性疼痛
目的:探讨趋化因子受体2(chemokine receptor 2,CCR2)和cAMP-PKA信号通路在大鼠炎性疼痛发生及维持中的作用.方法:72只雌性大鼠随机分为假手术组,炎性疼痛组和CCR2抑制剂组,每组24只,各组大鼠分别采取不同处理措施,分别于处理前(T0)、注药后1d(T1)、3d(T2)、5d(T3)和7d(T4)时,对左侧后足底双足机械缩爪阈值(mechanical paw withdrawal threshold,MWT)进行测定;分别于处理后T2、T3和T4时,利用ELISA法测定背根神经节细胞中cAMP水平,利用荧光定量PCR检测CCR2、PKA和CREB在背根神经节中的表达,利用Western blot检测pCREB蛋白在背根神经节中表达.结果:与T0时相比,炎性疼痛组和CCR2抑制剂组大鼠T1～4时MWT均降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);炎性疼痛组和CCR2抑制剂组大鼠T1～4时MWT均低于假手术组,CCR2抑制剂组大鼠T14时MWT均高于炎性疼痛组,差异均有统计学意义(P＜0.05);炎性疼痛组和CCR2抑制剂组大鼠T2～4时cAMP、CCR2 mRNA、PKA mRNA、CREB mRNA及pCREB蛋白表达量均高于假手术组,CCR2抑制剂组大鼠T2～4时cAMP、CCR2 mRNA、PKA mRNA、CREB mRNA及pCREB蛋白表达量均低于炎性疼痛组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:背根神经节中CCR2在炎性疼痛发生及进展中发挥重要作用,CCR2可能通过cAMP-PKA信号通路而参与炎性疼痛的发生.
关键词： 炎性疼痛 趋化因子受体2 cAMP-PKA信号通路 背根神经节 -
苔黑酚葡萄糖苷对L02细胞肝药酶CYP3A的调控作用研究
目的 观察苔黑酚葡萄糖苷对体外培养的正常肝细胞株L02中CYP3A的影响,探讨苔黑酚葡萄糖苷是否通过cAMP-PKA信号通路调控CYP3A的活性.方法 分别用cAMP-PKA信号通路中蛋白激酶A(PKA)激动剂环腺苷酸(cAMP)类似物8-溴-环腺苷酸(8-Br-cAMP)及其抑制剂H-89、苔黑酚葡萄糖苷干预L02细胞,MTT法检测细胞活力,完整细胞免疫组化法检测PKA蛋白表达,红霉素-N-脱甲基法检测CYP3A活性,Western blotting检测细胞中孕烷X受体(PXR)蛋白表达.结果 与对照组(加入不含药的无血清培养基)相比,苔黑酚葡萄糖苷处理后的细胞CYP3A的活性增强,PKA、PXR蛋白表达增强,与8-Br-cAMP的作用相似.结论 苔黑酚葡萄糖苷可通过cAMP-PKA信号通路调控CYP3A的表达,表明其可能是仙茅表现出辛热药性的主要成分之一.
关键词： 苔黑酚葡萄糖苷 仙茅 肝L02细胞 cAMP-PKA信号通路 CYP3A -
基于DA受体cAMP-PKA信号通路探讨加味当归芍药散 治疗HPRL大鼠的机制
目的 研究加味当归芍药散治疗高泌乳素血症(HPRL)大鼠的机制.方法 96只雌性SD大鼠采用随机数字表分为空白组,模型组,阳性组,高、中、低浓度组,每组16只,经背部皮下注射甲氧氯普胺液,制造HPRL模型,5天后造模成功,定时定量给药30天后立即处死取材,采用免疫组化法检测下丘脑多巴胺D1受体(DRD1)、D2受体(DRD2)、蛋白激酶A(PKA)的表达,酶联反应法(Elisa)检测各组大鼠血泌乳素(PRL)、多巴胺(DA)、环磷酸腺苷(cAMP),实时荧光定量PCR检测各组HPRL模型大鼠下丘脑多巴胺D1受体mRNA(DRD1 mRNA)、多巴胺D2受体mRNA(DRD2 mRNA).结果 与模型组相比,中高浓度组PRL水平降低[(260.12±4.814)、(241.98±8.351)比(332.18±9.472)](P<0.05),cAMP水平显著性降低[(1.05±0.427)、(0.89±0.745)比(1.37±0.002)](P<0.01),DA表达数量升高[(41.53±6.19)、(50.69±3.28)比(14.87±5.12)](P<0.05),三组不同浓度中药组与模型组比较,PKA活性明显降低,且低浓度组略高于高浓度组[(0.30±0.024)、(0.23±0.061)、(0.20±0.034)比(0.51±0.037),(0.30±0.024)比(0.20±0.034)](P<0.05);DRD1 mRNA表达各浓度组无差异、DRD2 mRNA表达增高且高浓度组表达量明显高于低浓度组[(0.20±0.322)比(0.11±0.700),P<0.05];与模型组比,DRD1有增高趋势,DRD2除了低浓度组数量略增高[(0.34±0.040)比(0.41±0.019),P<0.05],其余均明显增高(P<0.01).结论 加味当归芍药散可能作用于DRD2通过cAMPP-PKA信号通路发挥治疗高泌乳素血症模型大鼠的作用.
关键词： 大鼠 cAMP-PKA信号通路 加味当归芍药散 HPRL -
CCK-8抗炎作用中DAG-PKC信号通路对cAMP-PKA信号通路的影响
目的 探讨CCK-8抗炎作用中DAG-PKC信号通路对cAMP-PKA信号通路的影响.方法 分离纯化大鼠PIMs,分别用LPS、CCK、LPS+CCK、PMA、SC-3088、LPS+PMA、LPS+SC-3088、CCK+PMA、CCK+SC-3088、LPS+CCK+PMA、LPS+CCK+SC-3088孵育一定时间,采用125I-cAMP放射免疫分析法测定细胞内cAMP含量,用放射激酶法测定PKA活性.结果 单独应用PMA和SC-3088孵育大鼠PIMs,细胞内cAMP含量和PKA活性与正常对照组相比无明显变化(P>0.05).PMA可升高LPS作用下的细胞内cAMP含量和PKA活性(P<0.01),SC-3088则可使LPS作用下的细胞内cAMP含量和PKA活性降低(P<0.01).分别应用PMA、SC-3088与CCK共同孵育,则CCK+PMA组细胞内cAMP含量和PKA活性高于单独应用CCK组(P<0.01),CCK+SC-3088组则降低(P<0.01).与LPS+CCK组相比,PMA+LPS+CCK组细胞内cAMP含量和PKA活性升高(P<0.01),而SC-3088+LPS+CCK组细胞内cAMP含量和PKA活性降低(P<0.01).结论 在LPS诱导的大鼠PIMs,CCK-8可通过激活cAMP-PKA信号通路发挥抗炎作用；DAG-PKC信号通路的活化对cAMP-PKA信号通路有正性调节作用.
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复方莪术散对子宫内膜异位症患者cAMP-PKA信号通路及MMP-2和TIMP-2表达的影响
目的:观察复方莪术散对子宫内膜异位症患者cAMP-PKA信号通路及异位内膜基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinase-2,TIMP4)表达的影响.方法:86例子宫内膜异位症患者随机分为对照组和观察组各43例.对照组给予孕三烯酮胶囊和手术治疗;观察组在对照组治疗基础上给予复方莪术散.两组均治疗3个月.比较两组患者治疗前后血清肿瘤标志物糖抗原(carbohydrate antigen-125,CA125)、CA199、异位内膜组织和在位内膜组织cyclinD、P16、MMP-2、MMP-2 mRNA、TIMP-2和TIMP-2 mRNA水平.结果:与治疗前比较,治疗后两组患者的血清CA125、CA199水平均降低,差异有统计学意义(P＜0.05);与对照组比较,观察组患者治疗后血清CA125、CA199水平低于对照组(P＜0.05);观察组异位内膜组织中cyclinD、MMP-2 mRNA、MMP-2蛋白表达水平明显低于对照组(P＜0.05);观察组异位内膜P16、TIMP-2 mRNA、TIMP-2蛋白表达水平明显高于对照组(P＜0.05).结论:复方莪术散可以通过调节cAMP-PKA信号通路,提高子宫内膜异位症患者异位内膜TIMP-2 mRNA、TIMP-2蛋白表达水平,降低MMP-2 mRNA、MMP-2蛋白表达水平.
