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口腔细菌黏附机制的研究进展
口腔细菌黏附的机制是口腔微生物学和生态学的研究热点之一,近年来,随着分子生物研究水平的提高,口腔细菌黏附机制的研究在分子水平上有了较大的进展.细菌表面的黏附蛋白和受体以及菌毛和胞外多糖都参与细菌间的共聚及细菌对牙表面的黏附.材料表面的获得性薄膜、粗糙度、表面电荷和疏水性等特性也能影响细菌的定植和黏附.本文就细菌和材料两个方面对口腔细菌黏附的机制及控制细菌黏附的方法作一综述.
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牙龈卟啉单胞菌菌毛的生物学特性及毒力
菌毛（Fim）是牙龈卟啉单胞菌的重要致病因子之一，对宿主细胞的黏附发挥着重要作用。Fim是细胞表面的丝状突起，增强了细胞对唾液蛋白、细胞外基质和真核细胞以及同类或其他种属细菌的黏附性并参与生物膜的形成。FimA蛋白是牙龈卟啉单胞菌Fim的主要亚单位，与该菌侵入到牙周组织的上皮细胞及结缔组织内有关，而且还对牙槽骨具有一定的破坏作用。本文主要就Fim蛋白的生物学特性及其毒力等研究进展作一综述。
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伴放线放线杆菌菌毛研究进展
伴放线放线杆菌是侵袭性牙周炎的可疑致病菌,菌毛是其重要的致病因子.本文对伴放线放线杆菌菌毛的形态、相关基因和蛋白、基因表达的相关调控、致病作用以及免疫原性进行了综述.
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粘性放线菌菌毛生物性能的研究Ⅲ.粘性放线菌菌毛粘附与凝集活性的研究
目的:了解粘放菌两种菌毛在粘附牙面和与血链球菌34凝集中的生物活性.方法:采用粘放菌Ⅰ型和Ⅱ型菌毛提取物及两种抗菌毛抗体,通过它们对粘放菌粘附唾液包被的羟磷灰石(SHA)的抑制实验来判断两种菌毛的粘附活性,通过粘放菌与血链球菌34的凝集实验及两种抗菌毛抗体对凝集反应的抑制实验来确定两种菌毛的凝集活性.结果:①粘放菌Ⅰ型和Ⅱ型菌毛提取物及两种抗菌毛抗体均能抑制粘放菌对SHA的粘附;②只有Ⅱ型菌毛能间接引起肉眼可见的血链球菌34的凝集反应,抗Ⅱ型菌毛抗体能抑制凝集反应,抗Ⅰ型菌毛抗体无此抑制作用.结论:Ⅰ型和Ⅱ型菌毛均有粘附性能;Ⅱ型菌毛有凝集性能,Ⅰ型菌毛无凝集性能;本课题所采用的菌毛分离法未破坏菌毛的生物活性.
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粘性放线菌菌毛生物性能的研究Ⅰ.粘性放线菌菌毛的提取和鉴定
目的:本实验旨在建立一套提取和鉴定粘性放线菌菌毛的方法.方法:采用粘性放线菌变异株5519(1+2-)和5951(1-2+)分别提取Ⅰ型菌毛和Ⅱ型菌毛.首先用机械搅动法分离菌毛与菌体,进一步用凝胶过滤柱层析提取、纯化两种菌毛,并通过电镜观察和对流免疫电泳进行初步鉴定.结果:证实分别提取到Ⅰ型菌毛和Ⅱ型菌毛.结论:两种菌毛的提取为进一步分析研究它们的生化特征和生物活性奠定了基础.
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霍乱弧菌O139菌毛的提取及鉴定
为给霍乱弧菌亚单位菌苗的研制提供基础,作者对霍乱弧菌O139菌毛的提取和鉴定方法进行了探讨.结果发现,菌毛的佳表达条件为AKI或CFA培养基中30℃静止培养24～36小时.SDS-PAGE电泳证实了TcpA蛋白的存在,分子量为20.5kd.用鼠抗毒素共调菌毛(TCP)的单克隆抗体和羊抗鼠IgG-HRP作斑点酶免疫试验,结果为阳性.用TCP免疫大白兔所获得的免疫血清与O139型和El Tor型霍乱弧菌菌株作常规凝集试验,可见TCP与E1 Tor型菌株发生交叉反应.由此表明TCP可作为一种有效的保护抗原,用于霍乱菌苗的研制.
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Western-Blotting在粘放菌5519 I型菌毛鉴定中的应用
目的:检测粘放菌5519 I型菌毛的纯度及Western-Blotting方法的特异性.方法:采用SDS-PAGE电泳和Western-Blotting免疫印迹法.结果:粘放菌5519 I型菌Mr大部分为54 000,少部分为38 000.Western-Blotting检测结果与SDS-PAGE结果相一致.结论:Western-Blotting在粘放菌菌毛鉴定中具有高度特异性.
关键词： 菌毛 SDS-PAGE电泳 粘放菌 -
牙龈卟啉单胞菌菌毛质粒构建和蛋白纯化
目的: 构建牙龈卟啉单胞菌菌毛基因原核表达质粒,纯化菌毛融合蛋白.方法: 提取牙龈卟啉单胞菌DNA,通过PCR 法克隆菌毛基因,构建质粒并转化至感受态细胞中,选取佳条件诱导融合蛋白,通过谷胱甘肽巯基转移酶亲和层析法,纯化融合蛋白;免疫印迹法验证蛋白的准确性.结果: 实验显示低温高浓度诱导12 h 时构建的质粒融合蛋白表达量多;免疫印迹法检测在预期大小处显示特异性印迹条带.结论: 成功的获得了纯度较高的牙龈卟啉单胞菌菌毛蛋白.
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牙龈卟啉菌菌毛的研究进展
牙龈卟啉菌(Porphyromonas gingivalis, Pg)是目前获得公认的一种牙周致病菌.Pg含有大量毒性因子,如蛋白酶、菌毛、脂多糖、血凝素等.其中菌毛(Pili,fimbriae)在牙周致病作用中占据了一个重要地位,而且与Pg在口腔的定植有关.因其广泛的生物学活性成为牙龈卟啉菌研究的一个热点.现就Pg菌毛的相关研究进展综述如下.
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细菌粘附素的分子结构和装配机制
细菌感染的第一步是必须粘附于易感细胞,以获得立足点,在局部繁殖,释放毒素和酶类损坏组织,导致感染,细菌的粘附作用主要靠粘附素特异的识别并结合到宿主细胞的受体,使细菌在局部定居.本文主要菌毛粘附素的分子结构及基因控制,菌毛粘附素如何通过四种典型途径装配,以及参与装配的蛋白质是如何协调功能的研究进展.
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不同培养基条件下MSHB野生型和缺失型维罗纳气单胞菌动力检测
目的 通过TTC半固体培养基穿刺实验检测不同培养基条件下MSHB野生型和缺失型维罗纳气单胞菌动力.方法 半固体培养基穿刺阳性结果做T检测.结果 BHIB中,MSHB野生型和缺失型维罗纳气单胞菌穿刺结果比较,差异有统计学意义(P<0.05).LBA中,差异无统计学意义(P>0.05).结论 不同培养基基条件对菌毛动力影响很大.
