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安颤灵对帕金森病模型旋转行为及UPS功能影响的研究
目的 探讨中药安颤灵对帕金森病(PD)大鼠模犁泛素-蛋白酶体系统(UPS)功能的影响.方法 采用lactacystin立体定向注射人大鼠左侧黑质致密部和黑质纹状体通路,建立PD大鼠模型.经行为测试造模成功的PD模型大鼠27只,随机分为模删组与中药组,每组10只,同时另取10只脑内注射牛理盐水未出现旋转行为的大鼠作为正常对照组.正常对照组和模型组用牛理盐水灌胃,中药组同时间等体积安颤灵灌胃,共5 W.给药后第1、3、5周分别行阿朴吗啡(APO)诱导,观察记录其旋转行为及其他异常行为.给药结束后每组随机取6只大鼠行免疫组织化学检测,观察各组α-突触核蛋白(α-synuclein)、泛素(ubiquitin)蛋白表达.结果 中药组对APO诱导的旋转行为有明显抑制作用,与模型组相比较,其旋转圈数明显减少(P<0.01).与模型组相比,中药组α-synu-clein与硫磺素S、ubiquitin与硫磺素S荧光舣标染色阳性均较弱.结论 安颤灵可改善PD大鼠旋转行为及UPS的功能.
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安颤灵对蛋白酶体抑制剂lactacystin诱导PC12细胞凋亡的影响
观察安颤灵含药血清对lactacystin诱导PC 12细胞凋亡的影响.方法:按照血清药理学实验方法制备安颤灵含药血清,采用lactacystin作用于PC 12细胞,建立泛素-蛋白酶体系统损伤的细胞模型.将含药血清分为大、中、小剂量组,MTT方法检测各组的细胞活力:将对数生长期的PC 12细胞分为正常组、lactacystin组(损伤组)、中药组,通过Tunel及免疫细胞化学方法,观察各组细胞凋亡情况.结果:与大、小剂量组相比,中剂量组细胞的存活率显著升高(P<0.01);与正常组相比,lactacystin组细胞凋亡指数明显增加(P<0.01):与lactacystin组相比,中药组细胞凋亡指数明显降低(P<0.01).结论:安颤灵含药血清具有抗lactacystin诱导的细胞凋亡作用.
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安颤灵对泛素-蛋白酶体通路损伤细胞模型的保护作用
目的 利用中药血清药理学方法探讨安颤灵含药血清对lactacystin诱导PC12细胞损伤的保护作用及其可能机制. 方法 按照血清药理学实验方法制备安颤灵含药血清,将含药血清分为大、中、小剂量组(分别按7.3 g/kg、3.65 g/kg、1.83 g/kg添加药物),用lactacystin建立PC12细胞泛素-蛋白酶体系统(UPS)损伤模型.MTT方法检测各组的细胞活力.将对数生长期的PC12细胞分为正常组(DMEM+10%空白鼠血清)、损伤组(DMEM+10%空白鼠血清+10 μmol/Llactacystin)、安颤灵中剂量组(含DMEM+10%中剂量安颤灵含药血清+10 μmol/L lactacystin),通过免疫组化方法,观察各组细胞α-突触核蛋白、酪氨酸羟化酶(TH)表达的情况. 结果 与大、小剂量组相比,中剂量组细胞的存活率明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);与正常组相比,损伤组细胞α-突触核蛋白阳性细胞数增多,而TH阳性细胞明显减少,差异有统计学意义(P＜0.05);与损伤组相比,安颤灵中剂量组细胞α-突触核蛋白阳性细胞数减少,TH阳性细胞明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 安颤灵含药血清能改善细胞UPS的功能,降低细胞内α-突触核蛋白的聚集并上调TH表达,从而起到提高细胞存活率,保护神经元的作用.
