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补肾解毒方与健脾解毒方对慢性乙肝患者不同阶段的T淋巴细胞功能影响的研究
目的：比较补肾解毒方和健脾解毒方对乙肝病毒（Hepatitis B virus，HBV）慢性感染患者在不同免疫状态下外周血 T淋巴细胞（Ts）功能影响。方法：选取本院感染科2013年9月至2014年5月门诊慢性 HBV 感染患者40例，据患者不同免疫状态分为清除组和耐受组，另选本院健康职工10例作为对照组。采用大鼠补肾解毒药物血浆和健脾解毒药物血浆进行干预。以 T 淋巴细胞亚群 CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD28＋分子的表达及干扰素-γ（Interferon-γ，IFN-γ）的水平作为研究指标，判断干预对外周血 T 淋巴细胞（Ts）功能影响情况。结果：各组健脾组和补肾组血浆在干预后 CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD28＋的表达均显著升高，耐受组中 P ＜0．05，补肾组血浆干预后 CD28＋及 CD8＋分子显著高于健脾组，P ＜0．05；两种药物血浆分别干预后，CD28＋分子表达均显著高于清除组同期，P ＜0．05。结论：健脾解毒法和补肾解毒法均能促进慢性HBV 感染患者 T 细胞功能的恢复，免疫耐受期可能是中医药治疗的一个重要时期，补肾解毒药物效果优于健脾毒药物，需要分子实验和临床实验提供更多循证依据。
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补肾解毒方对核辐射致雌鼠生殖系统损伤的防护作用
目的:探究中药方剂补肾解毒方对核辐射导致雌鼠生殖系统急性损伤的防护作用.方法:将60只C57BL/6J雌鼠随机分为空白对照组、辐射模型组、补肾解毒方剂组.除空白对照组外,其余小组雌鼠均接受一次性5Gy60Co γ-射线的全身照射,动态观察各组雌鼠辐射后基本情况;于用药后分批处死雌鼠,观察各组雌鼠一般体征,体质量、卵巢质量天子天平称取,计算体质量、卵巢指数,光学显微镜观察卵巢、子宫组织病理形态学变化.结果:①与空白对照组比较,辐射后第1天辐射模型组、补肾解毒方组体质量、卵巢指数均显著下降(P＜0.01);辐射后第14天,补肾解毒方组体质量、卵巢指数都有恢复,与空白对照组比较,体质量下降差异无统计学意义(P＜0.05),卵巢指数差异有统计学意义(P＜0.05).辐射模型组与空白对照组、补肾解毒方组相比体质量、卵巢指数显著下降(P＜0.01,P＜0.05).②辐射后辐射模型组卵巢萎缩,卵泡数量减少;子宫上皮细胞形态不规整,基质松解,血管壁轻度增生,以嗜酸性炎细胞为主.补肾解毒方组雌鼠卵巢皮质增厚,卵泡分泌增多;子宫内膜增厚,组织结构基本正常.结论:补肾解毒方能缓解辐射所致的雌鼠生殖系统急性损伤.
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补肾解毒方与健脾解毒方含药血浆对慢性乙肝病毒感染不同免疫状态患者外周血树突状细胞功能的影响
目的 比较补肾解毒方和健脾解毒方对慢性乙肝病毒(HBV)感染不同免疫状态患者外周血树突状细胞(DCs)功能的影响.方法 选择36例湖南中医药大学第一附属医院201 0年4月-2011年1月门诊慢性HBV感染患者,根据患者免疫状态分为免疫耐受组(18例)、免疫清除组(18例),另选择10名健康人作健康组.分别采集抗凝外周静脉血,分离外周血单个核细胞(PBMCs),进一步分离提取培养DCs,采用大鼠补肾解毒方和健脾解毒方含药血浆进行干预.对DCs进行形态学鉴定,并检测DCs表型CD1α、CD80、CD86、HLA-DR表达,观察DCs培养上清液干扰素-α(interferon-α,IFN-α)的水平.结果 免疫清除组患者干预前CD80低于健康组(P＜0.05)；免疫耐受组患者干预前CD80、CD86、HLA-DR均低于健康组；免疫耐受组与免疫清除组干预前IFN-α低于健康组(P＜0.05),免疫耐受组患者干预前CD80、HLA-DR、IFN-α低于免疫清除组(P＜0.05).与本组干预前比较,各给药组CD80表达均升高(P＜0.05).免疫耐受组患者干预后CD80、HLA-DR高于免疫清除组同期,补肾解毒方组CD86高于免疫清除组同期,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 补肾解毒方中剂量和健脾解毒方小剂量均能促进慢性HBV感染患者DCs功能的恢复,且补肾解毒方对慢性HBV感染免疫耐受期患者DCs功能的影响更为显著.
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补肾解毒方对核辐射所致生殖系统损伤的防护作用
目的 观察补肾解毒方对核辐射所致雄性小鼠生殖系统损伤的防护作用. 方法 将60只C57BL/6J雄性小鼠随机分为空白对照组、辐射模型组、补肾解毒方组,每组20只,补肾解毒方组给予补肾解毒方13.5 g/(kg·d)灌胃,其他两组给予0.2ml生理盐水灌胃,各组均灌胃24天.除空白对照组外,其余两组小鼠于第11天接受一次性5Gy 60Coγ-射线的全身照射.观察各组小鼠一般体征;于辐射后第1、14天观察小鼠体质量,计算睾丸指数;于辐射后第14天光镜观察睾丸、附睾组织病理形态学变化.结果 辐射模型组附睾、睾丸组织细胞病理形态学有不同程度破坏,补肾解毒方组组织结构基本正常.辐射后第1天,与空白对照组比较,辐射模型组和补肾解毒方组小鼠体质量、睾丸指数均显著下降(P ＜0.05或P＜0.01),且补肾解毒方组睾丸指数高于辐射模型组(P＜0.05);辐射后第14天,补肾解毒方组体质量、睾丸指数均较辐射模型组显著升高(P＜0.05),且与空白对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 补肾解毒方能减轻辐射所致的生殖系统损伤,提升睾丸指数.
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补肾解毒方对辐射损伤小鼠胸腺、脾脏的影响
目的 观察补肾解毒方对辐射损伤小鼠的防护作用及其可能作用机制.方法 将TLR4基因敲除(TLR4-/-)小鼠和未敲除(TLR4+/+)小鼠随机分为空白对照组、辐射模型组、中药组.适应性喂养7天后,各空白对照组、辐射模型组小鼠均给予0.2ml生理盐水,中药组给予补肾解毒方13.50g/ (kg·d),连续灌胃10天,第11天除TLR4+/+和TLR4-/-空白对照组外,其余各组小鼠进行一次性60Coγ射线6Gy剂量照射,照射后第2天各组继续以上剂量灌胃14天.观察各组小鼠辐射后存活情况,记录各组小鼠辐射后第1、14、30天的体重、胸腺及脾脏质量,计算胸腺系数、脾脏系数.结果 TLR4+/+小鼠辐射模型组在辐射后第2～l4天共计死亡41只,中药组辐射后第7～10天共计死亡15只;TLR4-/-小鼠辐射模型组辐射后第5 ～13天共计死亡39只,中药组小鼠在辐射后第4～13天共计死亡38只.与同鼠种空白对照组相比,辐射模型组和中药组辐射后第1天小鼠胸腺系数、脾脏系数均有不同程度的降低(P ＜0.05或P＜0.01).TLR4+/+和TLR4-/-小鼠中药组辐射后第14、30天胸腺系数、脾脏系数较本组辐射后第1天明显升高(P＜0.05或P＜0.01).TLR4+/+小鼠中药组辐射后第14、30天胸腺系数较辐射模型组明显升高(P ＜0.05或P＜0.01);而TLR4-/-小鼠中药组与辐射模型组比较胸腺系数、脾脏系数差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 补肾解毒方可能通过TLR4信号途径显著减轻核辐射损伤,保护免疫器官,有较理想的辐射防护作用.
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补肾解毒方对电离辐射致小鼠性激素紊乱的防治作用
目的 探讨补肾解毒方对电离辐射致小鼠性激素紊乱的防治作用.方法 72只成年小鼠雌雄各半采用随机数表法分为6组,每组12只,分别为雌、雄性的空白对照组、辐射组、补肾解毒方组.适应性饲养2d后,补肾解毒方组给予浓度1.38 g/ml的补肾解毒方水溶颗粒剂0.2 ml灌胃,1次/d,灌胃10 d,第11天给予辐射组、补肾解毒方组一次性剂量为5 Gy的60 Coγ射线照射,照射后24 h,各组采用随机数表法抽取6只处死,检测性激素水平;补肾解毒方组继续予补肾解毒方灌胃1次/d,灌胃14 d,空白对照组与辐射组正常饮水饮食饲养,照射后第14天,其余小鼠处死取材,检测性激素水平.结果 辐射后第1天,雌鼠补肾解毒方组雌二醇(E2)升高,与雌鼠辐射组相比,差异有统计学意义(=2.686,P ＜0.01);雌、雄鼠辐射组卵泡雌激素(FSH)水平与空白对照组相比均明显升高(t=4.305、4.642,P＜0.01);雄鼠辐射组、补肾解毒方组黄体生成素(LH)水平升高,与雄鼠空白对照组相比,差异有统计学意义(t =4.537、2.336,P＜0.01).辐射后第14天,雄鼠睾酮(T)、LH辐射组低于空白对照组(t=-3.730、2.963,P＜0.05);雌鼠辐射组、补肾解毒方组E2、孕激素(P)下降,明显低于空白对照组(t=-5.424、-3.178,-2.690、-3.215,P＜0.01);雄、雌鼠辐射组FSH与空白对照组差异有统计学意义(t=-3.905、-2.812,P＜0.05).结论 电离辐射会导致性激素分泌紊乱,而补肾解毒方能有效抑制该情况的产生,其对电离辐射引起的性激素紊乱具有较好的防护作用.
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补肾解毒方配合西药治疗活动期狼疮性肾炎疗效评价
目的 观察补肾解毒方治疗狼疮性肾炎(LN)活动期患者的临床疗效. 方法 将活动期狼疮性肾炎患者随机分成治疗组和对照组各21例,对照组予常规西药治疗,治疗组加服中药补肾解毒方；治疗8周后,观察2组治疗前后疗效、症状积分及实验室指标的变化. 结果 治疗组总有效率、临床症状积分、相关实验室指标改善均优于对照组(P＜0.05),治疗组在改善24 h尿蛋白定量、血清白蛋白、血红蛋白、补体C3和C4均优于对照组(P＜0.05).结论 补肾解毒方配合西药治疗活动期狼疮性肾炎,在改善临床症状和提高整体疗效方面有着良好的效果,较单纯西药在改善某些实验室指标方面疗效显著.
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补肾解毒方中马钱苷和黄芩苷含量的高效液相色谱测定
目的 建立测定补肾解毒方中马钱苷和黄芩苷的含量的方法.方法 采用HPLC,色谱柱为Kromasil ODS-1 C18柱(100mm×4.6 mm,5μm).①黄芩苷:流动相为甲醇-0.1％磷酸溶液(42∶58),检测波长280 nm;流速1.0ml/min；选样量5.0μl；②马钱苷:流动相为水-乙腈(85∶15),检测波长236 nm,柱温为40℃,流速1.0 ml/min,进样量10μl.结果 补肾解毒方中黄芩苷在0.005 ～2.2 μg浓度范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为98.18％；马钱苷在0.999 6～ 199.92 μg浓度范围内线性关系良好(r=1.0),平均回收率为99.72％.结论 该方法简便、准确、分离效果好,可用于补肾解毒方的质量评价.
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补肾解毒方对慢性HBV携带者免疫耐受的临床研究
目的 观察补肾解毒方对慢性HBV携带者的血清HBV-DNA、HBsAg定量、HBeAg定量及IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10的影响.方法 采用随机、双盲、安慰剂对照的临床研究方法,对符合中医药干预标准的75例慢性HBV携带者,按照2:1比例随机分为两组,治疗组50例,予以补肾解毒中药方治疗,对照组25例,使用安慰剂治疗,疗程48周.治疗前后分别检测患者血清HBV-DNA、HBsAg及HBeAg定量及IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10的变化,进行疗效评价.结果 48周治疗后治疗组患者血清HBV-DNA、HBsAg定量、HBeAg定量下降幅度大于对照组(P＜0.05),IFN-γ、IL-2明显上升,IL-4、IL-10明显下降(P＜0.05).结论 补肾解毒方对HBV-DNA及HBsAg、HBeAg有一定的抑制作用,并可提高机体的细胞免疫功能.
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补肾解毒方与健脾解毒方含药血浆对慢性乙肝病毒感染不同免疫状态患者外周血T细胞功能的影响
目的:比较补肾解毒方和健脾解毒方对慢性乙肝病毒(HBV)感染不同免疫状态患者外周血T淋巴细胞(Ts)功能的影响.方法:36例门诊慢性HBV感染患者,根据患者免疫状态分为免疫耐受组(18例)、免疫清除组(18例),另选择10名健康人作健康组.分别采集抗凝外周静脉血,分离外周血单个核细胞(PBMCs),进一步分离提取培养T细胞,采用大鼠补肾解毒和健脾解毒药物血浆进行干预.检测T细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+以及CD28+分子的表达,观察T细胞培养上清液干扰素-γ(IFN-γ)的水平.结果:健脾解毒药物血浆与补肾解毒药物血浆干预后CD3+、CD4+、CD8+以及CD28+分子表达率升高,且补肾解毒药物血浆提高CD28+表达率优于健脾解毒药物血浆(P＜0.05).两种含药血浆干预后T细胞分泌的IFN-γ水平较干预前升高,差异有显著性意义(P＜0.05).结论:补肾解毒方和健脾解毒方都能促进慢性HBV感染患者T细胞功能的恢复,且两种含药血浆对慢性HBV感染免疫耐受期患者T细胞功能的影响更为显著.
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补肾解毒方对辐射小鼠外周血白细胞及脾脏 NF-κBp65的影响
目的：初步探讨中药方剂补肾解毒方对辐射小鼠外周血白细胞及脾脏 NF-κBp65的影响．方法：将背景为 C57BL／10JTLR4＋／＋及 TLR －／－小鼠均随机分为空白对照组、辐射模型组、补肾解毒方组，除空白对照组外，其余小组小鼠均接受一次性6Gy 60 Co γ-射线的全身照射，观察各组小鼠辐射后基本情况；同时在辐射后第1 d、第14 d、第30 d 各组取部分存活小鼠眼球采血，应用全自动生化仪检测各组小鼠白细胞数；并取其脾脏利用 Western Blot 检测蛋白 NF-κBp65的含量，观察蛋白含量差异．结果：（1）与空白对照组相比，辐射后1 d 小鼠白细胞呈下降趋势；辐射后14 d，TLR4＋／＋补肾解毒方组白细胞数高于其他3组（P ＜0.01或 P ＜0.05）；辐射后30 d，TLR4＋／＋补肾解毒方组白细胞恢复快但与空白对照组比较仍有显著性差异（P ＜0.05）．（2）与 TLR4＋／＋空白对照组相比，TLR4＋／＋辐射模型组 NF-κBp65蛋白含量增加（P ＜0.05），而 TLR4＋／＋补肾解毒方组 NF-κBp65蛋白含量首先高于 TLR4＋／＋空白对照组（P ＜0.05），后与 TLR4＋／＋空白对照组蛋白含量水平保持基本一致（P ＞0.05）．（3）与 TLR4－／－空白对照组相比，TLR4－／－辐射模型组和 TLR4－／－补肾解毒方组 NF-κBp65蛋白含量增加，而 TLR4－／－补肾解毒方组 NF-κBp65蛋白含量与 TLR4－／－辐射模型组无显著性差异（P ＞0.05）．结论：补肾解毒方通过 TLR4信号通路减轻辐射所致的白细胞损伤，调节 NF-κBp65蛋白含量，提高机体免疫力，有较理想的辐射防护作用．
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补肾解毒方对恶性肿瘤化疗中骨髓抑制的影响
目的:探讨补肾解毒方对恶性肿瘤化疗中骨髓抑制的影响.方法:选择恶性肿瘤化疗患者152例为研究对象,以随机数字表法分组,分为观察组与对照组,各76例.对照组单纯接受常规化疗,观察组在常规化疗基础上口服补肾解毒中药复方制剂.对比两组患者两个化疗疗程完成率及第1疗程中血象情况.结果:观察组两个化疗疗程完成率为97.37%,显著高于对照组的84.21%(P<0.05);第1疗程化疗后1周、3周时,观察组各血象指标均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:补肾解毒方可减轻恶性肿瘤化疗患者骨髓抑制,有助于骨髓造血功能恢复,提高化疗耐受性和成功率,值得临床推广.
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补肾解毒方中马钱苷和黄芩苷含量的高效液相色谱测定
目的：探讨研究高效液相色谱法测定补肾解毒方中马钱苷和黄芩苷含量．方法：色谱柱：Agilent TC-C18柱（4．6 mm ×250 mm，5μm，Agilent）．马钱苷：流动相为乙腈∶甲醇∶1 mL/L磷酸水溶液（10∶10∶80），检测波长为236 nm；黄芩苷：流动相为甲醇∶1 mL/L磷酸水溶液（40∶60），检测波长为280 nm，流速为1．0 mL/min，进样量为10μL．结果：马钱苷和黄芩苷分别在5．0～200 mg/L、2．5～100 mg/L范围内线性关系良好；精密度和重现性均为良好；平均加样回收率分别为98．89％和99．22％．结论：本研究所得方法操作简单，方法专属性高、重现性好，能准确测定补肾解毒方中马钱苷和黄芩苷含量，可用于补肾解毒方的质量评价．
