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2000年结核病流行病学抽样调查中耐药病例影响因素分析
目的 了解耐药结核病的危险因素.方法 根据2000年结核病流行病学抽样调查个案数据库资料,选取性别、年龄、病例分类、地区、卫Ⅴ项目5个因素进行单因素logistic回归分析.结果 影响耐药的因素分析中,初治病例分类为耐药结核病的保护因素(OR=0.337,95%CI:0.222～0.512).继发耐药影响因素分析中,45～59岁年龄组为继发耐药结核病的保护因素(OR=0.385,95%CI:0.201～0.738).结论 耐药、初始耐药、继发耐药的发生是多因素联合作用的结果,而非单一因素导致耐药,提示今后进行耐药结核病防治干预措施制定时,要考虑多种影响因素,制定综合防治措施,从而有效降低耐药结核病疫情.
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浙江省初始耐药结核病流行趋势
目的 了解浙江省初始耐药结核病疫情现状和变化趋势,评价现行结核病控制策略的效果.方法 按世界卫生组织<结核病耐药监测指南>(WHO/IUATLD)的要求对新登记初治涂阳肺结核病例进行耐药结核病监测,并与浙江省1998/1999年第1次耐药监测结果进行比较.结果 30个监测点共入选结核病例936例,对834株结核分枝杆菌进行4种抗结核药物[链霉素(S)、异烟肼(H)、利福平(R)和乙胺丁醇(E)]的耐药性测定,初始耐药率为26.6%,初始耐多药率为3.7%.初治耐药病例中,65.8%仅对1种药物耐药,4种药物的耐药率顺位由高到低依次为:S(19.2%)、H(12.4%)、R(5.0%)、E(4.O%),对1种和2种及以上药物的初始耐药率分别为17.5%和9.0%.与1998/1999年相比,全省初始耐药率上升显著(X2=34.606,P=0.000),耐多药率水平则呈现下降趋势,结核分枝杆菌耐药性发生更趋向于耐单一药.结论 浙江省初始耐多药结核病情况虽有所改善,但初始耐药结核病疫情依然严峻,进一步提高结核病控制质量是当务之急.
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人谷胱甘肽S-转移酶P1基因及其人群多态性
人类细胞质谷胱甘肽S-转移酶(hGSTs)超基因家族主要包括4个家族:A、M、T、P(按旧命名系统分别为α、μ、θ、π)[1],其中GSTM1以及GSTT1的人群多态性以及与疾病易感性关系的研究开展较早,也有了一定的积累[2～4].GSTP1的人群多态性问题则是近年来才引起医学界的注意.hGSTP1是hGSTs家族中酸性同工酶P1(有些文献中命名为GSTπ)的编码基因.1989年Board等人分离了人类GSTP1基因的cDNA克隆,将其定位于染色体的11q13,并首次报道了GSTP1基因的外显子5(ICe105→Val)和外显子6(Ala114→Val)存在多态性[5],并在12q13-14区段发现一个可能是由于部分反转录再插入形成的相关假基因.由于hGSTP1与一些人类环境致癌剂的体内代谢反应有关,其过表达与肿瘤药物耐受性密切相关,基因多态性不同形式与各种癌症易感性之间的关系也越来越多地受到关注.现将有关hGSTP1基因及其人群多态性研究现状介绍如下.
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结核分枝杆菌Rv2994基因原核表达及鉴定
目的构建结核分枝杆菌Rv2994基因原核表达载体并进行表达,为进一步研究奠定基础.方法PCR扩增Rv2994基因编码序列,定向克隆入融合蛋白原核表达载体pGEX-1λT获得重组表达质粒pGEX-2994,转化大肠杆菌测序后诱导表达,纯化目的蛋白并免疫新西兰大白兔获取多价抗体.结果从结核分枝杆菌H37Rv株基因组DNA中扩增出Rv2994基因,成功构建了融合表达质粒pGEX-Rv2994,转化大肠杆菌JM109后,经IPTG诱导,表达出约73kDa重组融合蛋白,用Western blotting证实其有良好的抗原性,纯化蛋白免疫新西兰大白兔,获得了高效价的抗体.结论成功构建了原核表达载体pGEX-2994,获得并纯化了GST-Rv2994融合蛋白,制备了高效价的多价血清,为Rv2994基因的功能研究奠定了基础.
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广东省广州市2001-2004年分枝杆菌初步菌种鉴定与药物敏感性试验结果分析
目的了解广州市2001-2004年3年间分枝杆菌菌种的分布状态和抗结核药物的耐受性情况,为临床诊断和治疗结核病提供可靠的科学依据.方法对2001年9月-2004年3月从1 459例患者中共分离出的2 154株分枝杆菌进行菌种鉴定,并采用绝对浓度间接法对结核分枝杆菌和部分非结核分枝杆菌进行4种抗结核药物的敏感性试验.结果非结核分枝杆菌的分离率由1998年7月-2001年9月的16.5%上升至20.3%;对2 154株分枝杆菌中的1 703株结核分枝杆菌复合群菌株进行的药物敏感性试验结果显示:原始耐药率由1998年7月-2001年9月的14.4%上升至20.3%.继发耐药率则由原来的35.4%下降至32.3%;而非结核分枝杆菌对抗结核药物基本上呈现高度的原始耐受性.结论对临床分离出的阳性标本,有必要进行分枝杆菌的菌种鉴定和药物敏感性试验.
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应用PCR-RFLP分析结核分枝杆菌rpsL基因突变
目的了解结核分枝杆菌链霉素(SM)耐药基因突变情况,建立快速检测耐药突变株的方法.方法通过PCR-RFLP分析62株结核分枝杆菌临床分离株的rpsL基因突变的部位和性质.结果以H37RV标准株为对照,13株敏感株的rpsL基因有MboⅡ酶切位点;37株耐SM分离株中,31株(83.8%)无MboⅡ酶切位点;12株耐其它抗结核药物株中,也有2株无MboⅡ酶切位点.结论大多数结核分枝杆菌SM耐药分离株的核糖体S12蛋白编码基因(rpsL)第43位密码子有点突变.PCR-RFLP可能成为快速检测结核分枝杆菌耐药突变株的一种新方法.
关键词： 分枝杆菌 结核 药物耐受性 聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 -
郑州市1992～1996年结核分支杆菌原发耐药性观察
了解郑州市1992～1996年结核分支杆菌原发耐药性。方法采用绝对浓度法进行6种抗结核药物的耐受性测定。结果总原发耐药率、耐RFP率分别由1992年的41.5%、19.5%降至1996年的29.6%、11.1%。结论 1992～1996年郑州市结核分支杆菌原发耐药率和耐RFP率呈下降趋势。
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广东省WHO结核病耐药监测研究
objective Based on the Guidelines for Surveillance of Drug Resistance in Tuberculosis of WHO/IUATLD set up a system for surveillance of drug resistance of pulmonary tuberculosis.To obtain the result on initial and acquired drug resistance rate of pulmonary tuberculosis in Guangdong province of China.Methods 40 counties were selected randomly in 113 counties of Guangdong province.39 cases of the new smear positive of pulmonary tuberculosis were intaken continuously in every county,including retreatment smear positive,Identify type of strains of culture positive and test drug resistance of the four kinds of antituberulosis drugs.Result Total drug resistance rate is 19.6%.Initial resistance rate was 18%.acquired drug resistance was 33.7%.Conclusion By strict training,all staff have grasped the drug resistance monitor system,based on the Guidelines for Surveillance of Drug Resistance in Tuberculosis of WHO/IUATLD.The result proved the drug resistance level in Guangdong is higher than that of developped countries.So national TB control program should be strengthen.
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1994-2003年广州老城区门诊病人耐药结核病流行状况分析
目的分析广州市老城区10年耐药结核病的流行状况和流行趋势,为今后结核病控制的有效开展提供决策依据.方法回顾性分析结核病肺部肿瘤防治所1994-2003年结核杆菌耐药性测定资料.结果 10年间,9 044株临床分离结核菌株的总耐药率、初始和获得性耐药率分别为23.7%、20.7%和34.6%,总耐药率、初始耐药率呈总体缓慢下降趋势,获得性耐药率反之;2 145株耐药株的耐药顺位为:H(20.3%)、R(10.2%)、S(9.5%)、E(5.0%),其中初始耐药率顺位为:H(17.7%)、R(8.3%)、S(8.1%)、E(4.1%),获得性耐药率顺位为:H(29.8%)、R(16.7%)、S(14.3%)、E(8.3%),耐单药、耐二药、耐多药率分别为:10.8%、3.4%和9.0%,其中其初始耐药率分别为:9.8%、3.0%和7.6%,获得性耐药率分别为:14.4%、4.6%和14.0%,10年间获得性耐H、R、S率及获得性耐多药率呈总体上升趋势,初始耐单药率则呈总体下降趋势.结论耐H和R菌株率和初始耐多药率的居高不下、获得性耐药率与获得性耐多药率的上升趋势、初始耐单药率总体下降趋势表明未来结核分枝杆菌耐药性发生更趋向于耐多种药物,必须采取积极有力的措施,控制耐药结核病尤其是耐多药结核病的流行与蔓延.
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DNA序列分析与PCR-SSCP分析结核分支杆菌利福平敏感性的比较
目的了解DNA序列分析与PCR-SSCP法分析利福平敏感性的价值.方法应用DNA序列分析与PCR-SSCP法检测利福平敏感的结核分支杆菌临床分离株25株、耐药株41株的利福平耐药相关基因rpoB基因核心区域的突变情况.结果 25株利福平敏感株DNA序列分析未检测到rpoB基因突变,41株耐利福平株中38株发生突变,突变率为92.7%(38/41);25株利福平敏感的结核分支杆菌菌株PCR-SSCP带型与对照H37Rv株相同,41株耐利福平结核分支杆菌菌株中38株SSCP带型不同于对照株,提示有突变存在.与DNA序列分析相比,PCR-SSCP检测准确率为93.9%(62/66),敏感度为92.1%(35/38);特异度是96.4%(27/28).结论 DNA序列分析对判断结核分支杆菌耐利福平非常有价值;PCR-SSCP可用于利福平耐药结核分支杆菌的初步筛选.
关键词： DNA序列分析 聚合酶链反应-单链构象多态性 药物耐受性 分支杆菌 结核 -
228例初治培阳肺结核病人短化疗效与耐药性分析
目的分析228例初治培阳肺结核病人其耐药性与短化疗效的关系.方法病人治疗采用全程隔日间歇短化方案,(2R3H3E3Z3/4R3H3).采用绝对浓度法进行药敏测定.结果 33例初治耐药肺结核病例,经6个月正规短程化疗失败率高达12.1%.(1)对耐R类药物者化疗失败率为40%(2/5),敏感组化疗失败率为2.6%(5/195),两组有显著性差异(P＜0.05);(2)对其他类(不含耐R类)化疗失败率为7.1%,与敏感组比较无显著性差异(P＞0.05).二年随访耐药组细菌复发率为3.5%,敏感组细菌复发率为1.1%.结论药物敏感病例和耐1种或2种药的病例(不含耐R类)采用6个月短程化疗方案是合理有效的.
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复治肺结核耐药性与用药史关系研究
目的 了解复治肺结核患者的用药史和耐药情况,为评价复治肺结核标准化疗方案适用性提供依据.方法 采用WHO/IUATLD 《结核病耐药监测指南》要求的整群抽样方法 ,在浙江省随机抽取30个监测县,药敏试验采用比例法,详细询问复治涂阳肺结核患者用药史并填写临床资料调查表,对药敏结果 和用药史进行相关分析.结果 复治肺结核病人耐药率和耐多药率分别为52.9% 和29.7%,对4种抗结核药物的耐药率顺位由高到低依次为:H(38.1%)、R(34.8%)、S(29.7%)、E(13.5%);其中复治标准化疗方案治疗失败的患者耐药率和耐多药率高,分别为77.3%和52.3%,首次复治患者的耐药率和耐多药率分别为45.1%和23.2%;耐药率和耐多药率均随用药时间和种类的增加呈升高趋势.结论 不同用药史的肺结核病例耐药率差异悬殊,现行标准复治化疗方案对部分患者可能无效,提示复治病人化疗方案应多元化.
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含阿米卡星及左氧氟沙星方案治疗耐多药肺结核近期疗效观察
目的观察和评估含阿米卡星及左氧氟沙星联合化疗方案在耐多药肺结核治疗中的疗效.方法将97例耐多药肺结核患者分为治疗组48例和对照组49例;化疗方案:治疗组以阿米卡星及左氧氟沙星为主,联合利福喷丁、异烟肼对氨基水杨酸钠、丙硫异烟胺、吡嗪酰胺;对照组用阿米卡星、利副喷丁、异烟肼对氨基水杨酸钠、丙硫异烟胺、吡嗪酰胺,疗程为21月.结果共有93例患者完成化疗疗程.治疗组46例,痰菌阴转率87%;对照组47例,痰菌阴转率59.6%;痰菌阴转率治疗组明显高于对照组(P<0.01).结论含阿米卡星及左氧氟沙星方案治疗耐多药肺结核有助于痰菌阴转和病变吸收好转,药物不良反应低,值得在临床上推广应用.
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浙江省肺结核病人耐药特征
目的掌握浙江省肺结核病人耐药特征,衡量全省结核病控制实施效果.方法 1997年20个监测点的门诊结核病人进行耐药测定,药敏试验采用绝对浓度间接法.结果 709例肺结核病人的初始耐药率为18.6%,对一药的耐药高(10.5%).初治敏感与耐药病人的化疗效果几乎同样好.复治耐药率为68.5%,以耐RH二药高(38.7%).复治耐药病人的化疗效果较差,治愈率为39.5%.结论浙江省结核病控制工作规范化起步较晚,今后的工作重点对初治涂阳病例采用合理化疗方案和DOTS管理.
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河南省第二轮结核病耐药监测及耐药趋势研究
目的掌握河南省2001年结核病耐药水平,评价1996-2001年耐药趋势,为结核病控制决策提供参考.方法采用整群抽样随机抽取30个监测点,各监测点连续入选43个新涂阳病人,同时纳入其间的复治涂阳病例.痰涂片镜检采用Ziehl-Neelsen法,培养用L-J培养基.对培养阳性的菌株用TCH和PNB进行菌型鉴定.对四种抗结核药物:INH,RFP,EMB和SM采用比例法进行药敏试验.结果总耐药率、初始耐药率及获得性耐药率分别为35.3%,29.8%和60.8%;总MDR率、初始MDR率和获得性MDR率分别为:12.9%,7.8%和36.6%.2001年河南省总耐药率、初始耐药率及总MDR率、初始MDR率较之1996年有所下降,但获得性耐药率及获得性MDR率变化不明显.结论河南省结核病耐药率仍处于全国5个监测省份之首和全球前几位,应引起高度重视.同时提示河南省需采取得力措施落实DOTS策略.
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结核分枝杆菌耐喹诺酮临床分离株gyrA基因突变的研究
目的了解结核分枝杆菌喹诺酮(quinolones)耐药株耐药基因突变情况,评价其应用价值.方法通过16S rRNA聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术分析77株分枝杆菌临床分离株; 通过PCR-SSCP和直接测序技术分析结核分枝杆菌的gyrA基因突变的情况.结果 75株为结核分枝杆菌复合群.30株喹诺酮敏感株的gyrA基因的SSCP图谱中,11株与H37Rv相同,19株与卡介苗相同;与卡介苗gyrA基因的SSCP图谱相同的敏感株95位密码子为ACC,与H37Rv该图谱相同的敏感株95位密码子为AGC.45株喹诺酮耐药株中,34株(75.6%)gyrA基因SSCP图谱泳动异常,对25株泳动异常、出现频率较高耐药株测序证实15株(44.1%)为94位密码子GAC→GGC突变;10株(29.4%)为90位密码子GCG→GTG的突变.结论结核分枝杆菌耐喹诺酮与gyrA基因突变有关,PCR-SSCP可能成为测定结核分枝杆菌耐喹诺酮类药基因型的快速、简便的方法.
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内蒙古乌兰察布盟结核分枝杆菌耐药性监测研究
目的掌握乌兰察布盟初始和获得性耐药水平.方法采用整群抽样方法,由内蒙统一抽样,乌盟的集宁、凉城、化德为监测点.各监测点连续选26个新发涂阳肺结核病例,期间的复治涂阳病例同时纳入,并对全部培养阳性菌株进行菌型鉴定及SM、INH、RFP、EMB4种抗结核药物的药敏试验.结果共入选107例培养阳性病例,总耐药率为52.3%,其中初始耐药率35.9%,获得性耐药率76.7%.初始耐多药率为7.8%,获得性耐多药率为53.5%.结论本地区耐药率均高于全国水平,特别是获得性耐药率高峰发生在25～34岁青壮年,应引起高度重视.
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第四次全国结核病流调分支杆菌药敏试验的方法学探讨
目的探讨比例法和绝对浓度法测试分支杆菌耐药性的一致性和可比性,对乙胺丁醇的效价计算方法进行分析探讨.方法对第四次全国结核病流调分离的453株分支杆菌用比例法和绝对浓度法同时进行4种抗结核药物(INH、SM、RFP、EMB)的耐药性测定,并用二种效价计算方法对乙胺丁醇的耐药性进行对比试验.结果 402株结核分支杆菌用二种方法测试的四种药物的耐药率均无显著性差异(P＞0.05),51株非结核分支杆菌中,除EMB用比例法测试的耐药率明显高于绝对浓度法外(P＜0.01),其余3种药物二种方法测试的耐药率无显著性差异.H、S、R、E二种方法测试结果的一致率分别为96.2%、97.1%、98.7%和96.9%.EMB用二种效价计算方法检测结果的一致率为99.1%.结论用比例法和绝对浓度法进行结核分支杆菌耐药性测定的一致性较高,药敏试验方法向比例法转轨,不会影响与我国既往资料的连续性和可比性.建议今后工作中对EMB的效价计算方法加以改进.
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29株偶然分支杆菌耐药性观察
目的了解偶然分支杆菌耐药性.方法确定的29株偶然分支杆菌临床分离株,进行主要抗结核药物作耐药性测定.结果对氧氟沙星、左氧氟沙星敏感,对6种抗结核分支杆菌药单一药敏试验均耐药.2～3种药物联合药敏试验显示低浓度耐药,高浓度敏感.结论建议采用敏感抗生素联合有协同作用的抗结核药进行化疗,可望取得临床治愈效果.
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浙江省耐药结核病现状及趋势研究
目的 了解浙江省耐药结核病疫情现状和变化趋势,评价DOTS策略执行的效果.方法 按WHO/IUATLD<结核病耐药监测指南>的要求对新登记涂阳肺结核病人进行耐药结核病监测,并与浙江省1998/1999年第一次耐药监测结果进行比较.结果 30个监测点共入选病人1 127例,对988株结核分枝杆菌进行4种抗结核药物(H、S、R、E)的耐药性测定,总耐药率30.6%,其中初始耐药率为26.6%,初始耐多药率为3.7%,获得性耐药率为51.9%,获得性耐多药率为29.2%.初始耐药病例中, 65.8% 仅对1种药物耐药, 4种药物的耐药率顺位由高到低依次为: S(19.2%)、H(12.4%)、R(5.0%)、E(4.0%), 对1种和2种及以上药物的初始耐药率分别为17.5%和9.0%.与1998/1999年相比,全省初始耐药率上升显著(χ2=34.606,P=0.000),耐多药率水平则呈现下降趋势, 结核分枝杆菌耐药性发生更趋向于耐单一药.结论 浙江省耐多药结核病情况虽有所改善,但耐药结核病疫情依然十分严峻,进一步提高DOTS质量是当务之急.
