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失苔刺知丸对大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织海马区Fas和FasL表达的影响
目的:观察失苔刺知丸对大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织海马区死亡因子(Fas),死亡因子受体(FasL)蛋白和FasmRNA,FasLmRNA表达的影响,探讨失苔剌知丸抑制海马区神经元细胞凋亡的作用机制.方法:将108只SPF级SD雄性大鼠适应性喂养1周后,按照随机数字表法分为6组:假手术组,脑缺血再灌注模型组(以下简称模型组),金纳多组,失苔剌知丸低剂量组,失苔剌知丸中剂量组,失苔刺知丸高剂量组,根据再灌注时间的不同,再分为12,24,72h3个亚组,每个亚组SD大鼠6只.脑缺血再灌注模型采用改良线栓法阻塞大鼠大脑中动脉(MCA)制成,术后2h进行再灌注.金纳多组、失苔刺知丸低剂量组、失苔刺知丸中剂量组、失苔剌知丸高剂量组分别在制作脑缺血-再灌注模型前30 min给予相应药物第1次灌胃,以后每天灌胃2次,失苔剌知丸:低剂量11.92 g·kg-1,中剂量23.83 g·kg-1,高剂量47.66 g·kg-1;金纳多浓度14.44 g·kg-1,鼠灌胃容积为10 mL·kg-1;假手术组、模型组按同样方法予以等量蒸馏水灌胃,每组3个亚组在给药时间分别持续12,24,72 h后取材.通过蛋白免疫印迹(Western blot)以及实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)的方法,观察失苔刺知丸对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织海马区Fas,FasL蛋白及Fas,FasL mRNA表达的影响.结果:与假手术组比较,模型组及各用药组各时间点Fas,FasL表达明显增高(P＜0.01);与模型组比较,各用药组各时间点Fas,FasL表达明显减少(P＜0.01);与金纳多组比较,失苔刺知丸中剂量组Fas,FasL表达无显著性差异,失苔刺知丸高剂量组各时间点Fas,FasL表达有所减少(P ＜0.05,P＜0.01),尤以72 h组减少明显(P＜0.01).结论:失苔剌知丸对脑缺血再灌注损伤具有较好保护作用,其机制可能与抑制海马区神经细胞凋亡有关.
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黔产莪术油对直肠癌SW1463细胞株分泌Toll样受体及相关免疫因子的影响
目的:通过研究黔产莪术油对直肠癌SW1463细胞中死亡因子受体(Fas)的蛋白表达及分泌的免疫因子Toll样受体2(TLR2),Toll样受体4(TLR4),白细胞介素-10(IL-10),癌基因C-Raf转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响,探讨黔产莪术油对肿瘤细胞的免疫效应.方法:将水蒸气蒸馏提取的黔产莪术油,配置成空白组,黔产莪术油80,120,160,200 mg·L-1组,作用于直肠癌细胞SW1463细胞24 h后,采用免疫酶联免疫吸附测定(enzymeLinked immunosorbent assay,ELISA)检测不同质量浓度黔产莪术油对IL-10水平的影响,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Fas,TLR2,TLR4,C-Raf,TGF-β11蛋白表达对直肠癌细胞SW1463的增殖抑制作用.结果:ELISA检测发现,与空白组比较,莪术油组IL-10水平随着药物浓度的升高表达降低(F=23.11,P＜0.01).Western blot结果显示,与空白组比较,莪术油组随着药物浓度的升高,TLR2,TLR4,C-Raf蛋白表达显著降低(P ＜0.01);Fas,TGF-β1蛋白表达明显降低(P＜0.05).结论:黔产莪术油抑制SW1463细胞的作用免疫作用机制可能与下调Fas/FasL通路有关,使得Toll样受体TLR2,TLR4蛋白表达下调,导致相关因子TGF-β1的表达下调,从而使得细胞凋亡,起到免疫增强作用.
