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黄精地龙提取液对老年痴呆大鼠脑内烟碱型乙酰胆碱受体的影响
目的:探讨黄精地龙提取液(EPP)对老年痴呆大鼠脑内α3和α7烟碱型乙酰胆碱受体(α3,α7-nAChR)阳性神经元数量、蛋白及mRNA表达的影响.方法:SD大鼠40只,随机均分为正常组,模型组,脑复康(阳性药物,0.6 g·kg-1·d-1)组,EPP(相当生药量4 g·kg-1·d-1)组.给大鼠颈背部皮下注射1％D-半乳糖(5 mL·kg-1 ·d-1,连续3周)后,腹腔注射东莨菪碱(2 mg·kg-1·d-1,连续后2周)复制大鼠老年痴呆模型;造模1周后同时对脑复康组及EPP组大鼠每天灌胃给相应实验药物,正常组及模型组大鼠灌胃给生理盐水1 mL.实验结束,处死各组大鼠,取出脑组织,一半置于10％中性甲醛液浸泡固定待组织切片检查,另一半置于冰上匀浆,进行mRNA及蛋白提取;运用尼氏染色、免疫组化观察各大鼠大脑皮层第一躯体感觉区(S1Tr)和海马CA1与CA3区的阳性神经元数量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白质免疫印迹(Westernblot)检测各大鼠大脑内的a3和a7-nAChR mRNA及蛋白的表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠大脑S1Tr区和海马CA1及CA3区神经元数量显著减少,大脑内α3和α7-nAChR mRNA和蛋白表达水平均降低(P＜0.01);EPP能增加痴呆大鼠大脑S1Tr区和海马CA1及CA3区神经元数量,能升高痴呆大鼠大脑内α3和a7-nAChR mRNA和蛋白的表达水平,与模型组比较差异有统计学意义(P ＜0.05,P＜0.01).结论:EPP能保护大脑认知学习记忆有关重要区的神经细胞,同时触发α3和α7-nAChR受体效应,提高中枢乙酰胆碱(ACh)含量,进而升高老年痴呆大鼠中枢胆碱能系统活性.
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黄精地龙提取液对老年痴呆大鼠脑内M胆碱能受体影响的研究
目的:探讨黄精地龙提取液对老年痴呆大鼠脑内M1、M2-AchR受体的影响.方法:采用颈背部皮下注射1％D-半乳糖联合腹腔注射东莨菪碱复制大鼠老年痴呆模型,再用2、4、8g/kg·d量的黄精地龙提取液灌胃痴呆大鼠,运用Moms水迷宫、尼氏染色、免疫组化观察各大鼠大脑皮层第一躯体感觉区(S1Tr)和海马CA1与CA3区的阳性神经元数量;RT-qPCR、Western blot检测各大鼠大脑内的M1,M2-AchR mRNA及蛋白的表达.结果:2～8g/kg·d剂量范围内的黄精地龙提取液能能改善衰老痴呆大鼠的行为、学习记忆能力;能增加痴呆大鼠大脑S1Tr区和海马CA1及CA3区神经元数量;能升高痴呆大鼠大脑内M1-AchR mRNA和蛋白的表达水平,但对M2-AchR mRNA和蛋白表达水平无明显影响.结论:黄精地龙提取液能保护大脑认知学习记忆有关重要区的神经细胞,同时触发M1受体后效应,提高中枢Ach含量,进而升高老年痴呆大鼠中枢胆碱能系统活性.
