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加味四君子汤含药血清对肝癌Hep-G2细胞的影响
目的:探讨加味四君子汤含药血清对肝癌Hep-G2细胞增殖、凋亡、周期的影响及其作用机制.方法:不同浓度加味四君子汤含药血清处理Hep-G2细胞后,采用细胞活性检测试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖;AnnexinV/碘化丙啶(PI)流式细胞术检测细胞凋亡率和周期;hoechst33342荧光染色观察细胞凋亡形态;免疫印迹法(Western blot)检测细胞中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白表达水平.结果:加味四君子汤含药血清呈浓度依赖性抑制肝癌Hep-G2细胞的增殖,诱导Hep-G2细胞凋亡,阻滞细胞于G0/G1期.hoechst33342染色后,随着含药血清浓度的增加,Hep-G2细胞核显著呈碎块状致密浓染.同时,加味四君子汤含药血清能够抑制Hep-G2细胞Akt,mTOR,核糖体S6蛋白激酶(S6),真核翻译起始因子4E结合蛋白1(4EBP1)的磷酸化,从而上调Bcl-2相关X蛋白(Bax)和下调细胞周期蛋白(CyclinD1),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的表达.加味四君子汤含药血清与300 nmol·L-1的PI3 K/mTOR双重抑制剂VS-5584联合使用具有协同作用,含药血清能增强PI3K/mTOR双重抑制剂VS-5584对Hep-G2细胞中PI3 K/Akt/mTOR信号通路靶点Akt和mTOR磷酸化的抑制作用.结论:加味四君子汤含药血清能抑制Hep-G2细胞的增殖,诱导其凋亡,阻滞其于G0/G1期,其机制可能通过阻断PI3 K/Akt/mTOR信号通路而实现.
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PI3K/Akt/mTOR信号通路及mTOR抑制剂治疗肿瘤的研究进展
目前,特异性的小分子抑制剂靶向杀伤肿瘤细胞已成为研究热点。PI3K/Akt/mTOR作为一个已被证实影响肿瘤发生、发展、迁移、侵袭的信号通路,mTOR是其中一个关键的靶点。本文探讨了近年来国内外对于PI3K/Akt/mTOR信号通路的机制和以及mTOR抑制剂对于肿瘤治疗的研究。