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活血益气方及其拆方药物血清对VEGF165转染脐静脉内皮细胞分泌MMP-9,MMP-2的影响
目的:探讨活血益气方及其拆方含药血清对含有血管内皮生长因子(VEGF) 165的重组质粒pcDNA3.1-VEGF165转染人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分泌基质金属蛋白酶(MMP)2,9的影响.方法:构建pcDNA3.1-VEGF165重组质粒,采用Fugene HD将质粒瞬时转染至HUVEC中.制备活血益气方及其拆方含药大鼠血清、生理盐水正常血清,以5%药物血清作用于转染后的HUVEC,Western blot法检测VEGF的表达,ELISA法测定MMP-2,MMP-9的表达.结果:(1)活血益气方组VEGF蛋白表达高于生理盐水组,与之比较有统计学差异(P<0.01).拆方各组则低于活血益气方组,与之比较有统计学差异(P<0.01).(2)活血益气方组、活血方组MMP-2含量高于生理盐水组,与之比较有统计学差异(P<0.05,P<0.01).拆方各组中仅益气方组MMP-2含量低于活血益气方组,与之比较有统计学差异(P<0.01).(3)活血益气方及其拆方各组MMP-9含量均高于生理盐水组,仅活血益气方组、活血方组与之比较有统计学差异(P<0.01,P<0.05).拆方各组MMP-9含量均低于活血益气方组,与之比较具有统计学差异(P<0.01).结论:活血益气方可以促进转染后HUVEC表达VEGF及分泌MMP-2,MMP-9,活血方药在这方面起主要作用.推测其治疗性血管生成作用机制可能与促进内皮细胞分泌MMP,从而促进内皮细胞迁移,提高血管通透性有关.
关键词: 活血益气方 人脐静脉内皮细胞 血管内皮生长因子165质粒 转染 基质金属蛋白酶