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高效液相-电化学法测定大鼠血浆中单胺类神经递质及其代谢产物
目的:建立高效液相色谱-库仑阵列电化学法测定大鼠血浆中的单胺类神经递质及其代谢产物含量的分析方法.方法:采用Agilent公司的1200型高效液相色谱仪和ESA公司库仑2通道电化学检测器,以3,4二羟基苄胺(DHBA)为内标,测定大鼠血浆中的肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、高香草酸(HVA)和5-羟色胺(5-HT)的含量.色谱柱:Zorbax Eclipse XDB-C18 (4.6 mm×150 mm,5μm),加EasyGuard预柱;流动相:含一水合柠檬酸80 mmol·L-1,柠檬酸三钠73.4 mmol·L-1,1-辛烷磺酸钠0.12 mmol·L-1,乙二胺四乙酸二钠0.1 mmol·L-1,18%甲醇的混合溶液,pH4.3;流速:1.0mL·min-1;柱温:25℃;进样量:10 μL;测定电极电势:-150 mv和400 my.结果:NE、E、DA、HVA和5-HT的低检测浓度分别为2.0,3.0,5.4,5.2,11.1 ng·mL-1;平均回收率分别为99.72%、85.33%、83.15%、120.43%、103.56%;日内(n=6)和日间(n=3)精密度RSD小于9.12%.结论:本方法操作简便、准确、快速、灵敏度高.可用于大鼠血浆中相关单胺类神经递质的检测和研究.
关键词: 单胺类神经递质 高效液相色谱 库仑阵列电化学检测器 儿茶酚胺