首页 > 文献资料
-
霍乱弧菌活的非可培养状态研究进展
霍乱弧菌是霍乱的病原体,广泛存在于海洋及江河入海口环境中.在不良环境中霍乱弧菌会进入活的非可培养状态(viable but non-culturable state,VBNC),常规分离方法检测不到,在条件合适时VBNC状态的霍乱弧菌会复苏为可培养状态.本文对近年霍乱弧菌VBNC相关研究做了回顾,以期能够为霍乱弧菌越冬机制以及霍乱的监测提供参考.
-
细菌活的非可培养状态及其卫生学意义
细菌活的非可培养状态是指在常规非选择性培养基上不能生长,但细菌处于存活状态并具有代谢活性的状态.许多细菌包括病原微生物可进入这一状态并保持毒力或致病性.本文就细菌的活的非可培养状态的诱导因素、理化特性、复苏培养、检测方法和卫生学意义进行了综述.
-
产肠毒素大肠埃希菌活的非可培养状态实验室初步研究
目的初步研究产肠毒素大肠埃希菌(ETEC)7株"活的非可培养状态"菌株的形态学、抗原特性以及复苏后生物学、抗原特性、致病性、药物敏感性等特性.方法运用常规革兰染色、动物肠腔复苏、复苏菌株致病性、血清学凝集、生化鉴定、体外药物敏感等试验观察"活的非可培养状态"ETEC及复苏后生物学特性的变异.结果这7株"活的非可培养状态"ETEC除菌体营养细胞缩小成球形休眠体外,其他特性均无明显变异,仍保留着较强的致病力.结论细菌"活的非可培养状态"的存在,提示在传染病日常监测过程中应注意这种细菌的存在状态.
-
水中活的非可培养状态痢疾志贺菌荧光定量PCR检测方法研究
目的 建立活的非可培养(viable but nonculturable state,VBNC)状态痢疾志贺菌逆转录荧光定量PCR (reverse transcription quantitative PCR,RT-qPCR)检测方法.方法 低温寡营养诱导痢疾志贺菌进入VBNC状态,用平板计数法和荧光显微镜检法确定细菌的可培养数和活菌数,以痢疾志贺菌的志贺毒素基因stx( GenBank:M19437)、侵袭性毒力基因ipaH( GenBank:NC_007607)为目的基因设计引物,提取RNA进行RT-qPCR检测,研究检出限并建立标准曲线,用加标于环境水体中的志贺菌水样进行方法验证.结果 建立处于VBNC状态的痢疾志贺菌RT-qPCR检测技术,检测时间少于6h,复杂环境水体中每500μl水样可培养的痢疾志贺菌检出限为1～5 cfu,VBNC状态的痢疾志贺菌3～25 cfu.结论 该方法检测快速,可实现对VBNC状态志贺菌的检测,可用于复杂水样的直接检测,适用于水体污染调查和应急反应时快速筛查志贺菌.
关键词： 痢疾志贺菌 活的非可培养状态 逆转录荧光定量PCR -
金黄色葡萄球菌活的非可培养状态的诱导和检出
目的 研究金黄色葡萄球菌"活的非可培养状态"(viable but non-culturable state,VBNC)的诱导和检出方法.方法 将107 cfu/ml的金黄色葡萄球菌ATCC13565分别采用4℃冷藏、-20℃冷冻及添加0.01～0.05 mmol/L铜离子的方法进行诱导,并对VBNC菌体进行了检测;采用逐步升温和化学促进法对VBNC菌体进行复苏试验.结果 -20℃低温冷冻诱导72 h或经0.015 mmol/L Cu2+诱导4 d均可诱导菌体进入VBNC;在培养基中添加0.5%吐温20或1%过氧化氢酶培养24 h均可使处于VBNC的菌体实现复苏.结论 金黄色葡萄球菌可以通过诱导进入VBNC;而经过复苏后的金黄色葡萄球菌与正常菌体在通用的检验培养基中菌落形态和生理生化反应均一致.
-
大肠埃希菌在不同水环境中存活状态的实验研究
目的 研究大肠埃希菌在水中的存活时间及影响存活时间的因素.方法 将大肠埃希菌加标于灭菌生理盐水和无菌自来水中制成模拟水样,分别在4℃和室温(25℃)下存放90 d,用Live/Deacl荧光染色镜检法确定细菌总数和活菌总数,用胰大豆蛋白胨琼脂(TSA)和平板计数琼脂(PCA)确定细菌的可培养数.结果 大肠埃希菌加标于水中,在90 d内细菌总数未发生较大变化;在生理盐水中,活菌总数未发生较大变化,4℃低温条件下可培养菌数逐渐下降为0,在25℃室温条件下可培养菌数下降3个数量级;在无菌自来水中,可培养菌数逐渐下降为0,4℃低温条件下活菌总数未发生较大变化,25℃室温条件下活菌总数逐渐下降为0.结论 在4℃低温诱导下,大肠埃希菌在水中可进入活的非可培养状态:在室温下,大肠埃希菌在水中可保持较长时间的可培养性;富营养的TSA琼脂检测的菌落数多于寡营养的PCA琼脂:用平板涂布法检测水中的大肠埃希菌可能低估了肠道致病菌污染的风险.
