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非发酵菌和环丙沙星敏感肠杆菌科细菌中质粒介导喹诺酮类耐药基因的检测
目的 了解3类质粒介导的喹诺酮类耐药基因在浙江省温州地区分离的非发酵菌和环丙沙星敏感肠杆菌科细菌中的分布情况.方法 收集2008年1月至2013年6月温州地区分离的非发酵菌和环丙沙星敏感肠杆菌科细菌,共600株,其中非发酵菌419株,环丙沙星敏感肠杆菌科细菌181株.采用聚合酶链反应(PCR)检测qnrA、qnrB、qnrS、aac(6)-Ib以及qepA基因,并通过DNA测序确定qnr基因型和aac(6')-lb-cr基因变异体;通过接合转移实验研究细菌质粒介导的耐药性传递情况.结果 419株非发酵菌临床株中未检测到qnrA、qnrB、qnrS、aac(6')-Ib和qepA等耐药基因.181株环丙沙星敏感的肠杆菌科细菌临床株中未检到qepA,检到2株qnrA1阳性株,分别为1株肺炎克雷伯菌和1株大肠埃希菌;2株qnrB4阳性株,均为阴沟肠杆菌复合菌;12株检测到aac(6')-Ib,分别为6株大肠埃希菌、3株阴沟肠杆菌复合菌和3株克雷伯菌属细菌.接合转移试验中,2株qnrA1阳性株和1株qnrB4阳性株接合转移成功,12株携带aac(6')-Ib-cr基因的阳性株中4株接合转移成功.结论 温州地区,质粒介导的喹诺酮类耐药基因不仅存在于环丙沙星耐药株中,而且还存在于环丙沙星敏感的肠杆菌科细菌中,可能不存在于非发酵菌中.
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肠杆菌科临床株质粒介导的喹诺酮类耐药机制的研究
目的 了解天津地区肠杆菌科临床株中质粒介导的喹诺酮类耐药基因qnrA、aac(6')-Ib-cr的分布并研究其耐药机制.方法 从天津地区8家三甲医院收集环丙沙星耐药(CPLX,MIC≥4μg/ml)的肠杆菌科菌株共116株,包括77株大肠埃希菌、24株阴沟肠杆菌、15株克雷伯菌属细菌.应用PCR方法筛查所有临床株的qnrA基因,并对大肠埃希菌进行aac(6')-Ib的检测;琼脂稀释法测菌株的药敏情况;DNA测序检测aac(6')-Ib-cr基因变异体;接合传递试验方法探讨细菌质粒介导的耐药性传递.结果 116株喹诺酮类耐药的肠杆菌科临床株中未发现qnrA基因阳性株;77株环丙沙星耐药的大肠埃希菌.15株检出aac(6')-Ib,其中对卡那霉素耐药10株、中敏4株、敏感1株;选出对卡那霉素耐药表型不同的6株菌的aac(6')-Ib扩增产物进行测序,结果表明5株菌在第223位(T→C或T→A)和454位(G→T)发生变异,均携带aac(6')-Ib-cr;6株测序菌株中4株接合传递成功,临床株对喹诺酮类和氨基糖甙类的耐药性部分传递给了受体株.结论 qnrA基因在天津地区116株肠杆菌科临床株中甚为罕见;首次在天津发现aac(6')-Ib-cr介导的喹诺酮类耐药.
关键词： 肠杆菌科 质粒 耐药 qnr基因 aac(6')-Ib-cr基因 -
肺炎克雷伯菌质粒介导的喹诺酮类耐药基因的研究
目的 研究本地区质粒介导的喹诺酮类耐药基因aac(6')-Ib-cr和qnr在肺炎克雷伯菌中的发生率及接合子对环丙沙星和左氧氟沙星不同耐药水平的发生机制.方法 筛选2007年7月～2008年12月本院临床分离的产超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌共57株,采用PCR法检测qnrA、qnrB、qnrS和aac(6')-Ib阳性菌株并对部分菌株进行测序.以大肠埃希菌J53为受体菌,通过接合试验从aac(6')-Ib-cr和(或)qnr阳性菌株中获得接合子,采用E-test方法测定菌株的药敏情况.结果 所分离的57株肺炎克雷伯菌中aac(6')-Ib基因阳性菌12株,经测序全部为aac(6')-Ib-cr基因,阳性检出率为21.1%;qnr基因阳性菌25株(43.9%),其中3株(5.3%)含qnrA基因,21株(36.8%)含qnrB基因,20株(35.1%)含qnrS基因; aac(6')-Ib-cr、qnrA、qnrB和qnrS均阳性菌共3株(5.3%),qnrB和qnrS均阳性菌共13株(22.8%).本研究中共有14株菌株接合试验获得成功,环丙沙星和左氧氟沙星对接合子的低抑菌浓度(MIC)范围分别为0.25～0.5 μg/ml和0.25～1 μg/ml;接合子与受体菌的MIC值比较结果显示,环丙沙星耐药性提高了31～63倍,左氧氟沙星耐药性提高了17～63倍.结论 本地区产超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌质粒介导的喹诺酮类耐药基因aac(6')-Ib-cr和qnr携带率很高,部分菌株的喹诺酮类抗菌药物MIC值升高与喹诺酮类耐药基因aac(6')-Ib-cr和(或)qnr有关.
关键词： 肺炎克雷伯菌 喹诺酮类 耐药 aac(6')-Ib-cr基因 qnr基因 -
肺炎克雷伯菌质粒介导的喹诺酮类耐药基因aac(6')-Ib-cr的研究
目的 调查本院临床所分离的产超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌中质粒介导的aac(6')-Ib-cr基因的存在情况,为临床预防感染及合理使用抗菌药物提供依据.方法 收集2007年7月～2008年12月本院临床分离的产超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌共57株,采用PCR技术检测aac(6')-Ib基因,并对阳性菌株进行测序.以大肠埃希菌J53为受体菌,通过接合试验从aac(6')-Ib-cr阳性菌株中获得的接合子,采用E-test方法测定菌株的药敏情况.结果 57株肺炎克雷伯菌中,aac(6')-Ib基因阳性菌共12株,经测序全部为aac(6')-Ib-cr基因,阳性率为21.1%.aac(6')-Ib-cr基因阳性肺炎克雷伯菌中6株接合试验获得成功.环丙沙星对接合子的MIC值均为0.5 μg/ml,左氧氟沙星对接合子的MIC值均为0.25 μg/ml;接合子与受体菌MIC值比较,环丙沙星和左氧氟沙星的耐药性分别提高了63倍和17倍.结论 本院产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌质粒介导的喹诺酮类耐药基因aac(6')-Ib-cr携带率很高,临床上应加强喹诺酮类耐药基因的检测,以避免产aac(6')-Ib-cr基因菌株感染的暴发流行.
关键词： 肺炎克雷伯菌 喹诺酮类 抗药性 aac(6')-Ib-cr基因 -
大肠埃希菌临床分离株aac(6')-Ib-cr基因的检测
目的:了解温州地区大肠埃希菌I临床株中质粒介导的喹诺酮类耐药基因aac(6')-Ib-cr的分布、耐药情况.方法:收集温州医学院附属第一医院环丙沙星耐药的大肠埃希菌临床株60株,应用PCR方法检测其aac(6')-Ib基因,琼脂稀释法检测菌株的耐药情况,DNA测序aac(6')-Ib-cr基因变异体,用接合传递试验方法验证细菌质粒介导的耐药性的可转移性.结果:60株大肠埃希菌临床株检出10株aac(6')-Ib,其扩增产物进行测序,结果表明4株菌在第223位(T→C或T→A)发生变异,均携带aac(6')-Ib-cr基因;这4株菌接合传递试验成功,临床株对喹诺酮类的耐药性传递给了受体株.结论:温州地区aac(6')-Ib-cr介导的喹诺酮类耐药的大肠埃希菌较普遍存在.
关键词： 大肠埃希菌 质粒 aac(6')-Ib-cr基因 -
连云港地区大肠埃希菌质粒介导喹诺酮类抗菌药耐药基因检测
目的 了解连云港地区临床分离的大肠埃希菌质粒介导喹诺酮类抗菌药物耐药基因的携带状况,为临床喹诺酮类药物耐药的预防提供指导.方法 采用PCR检测88株分离自连云港地区的大肠埃希菌株的质粒介导喹诺酮耐药基因qnrA,qnrB,qnrS和aac(6')-Ib-cr,将阳性结果进行测序分析确认,并通过将aac(6')-Ib序列与Genbank登记序列比对以确定aac(6')-Ib-cr;分析基因阳性菌株的喹诺酮类药物的药敏结果.结果 在检测的大肠埃希菌临床分离株中,共检出qnr基因阳性7株(7.95%),其中qnrB基因2株(2.27%),qnrS基因5株(5.68%),未检出qnrA基因阳性菌株.检出aac(6')-Ib基因阳性菌株12株(13.64%),经测序确定其中6株(6.82%)为aac(6')-Ib-cr基因.检测出的12株qnr和aac(6')-Ib-cr基因阳性的大肠埃希菌中,8株对喹诺酮类耐药,3株对喹诺酮类敏感,1株对左旋氧氟沙星敏感但对环丙氟派酸耐药;有11株为产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株.结论 连云港地区临床分离的大肠埃希菌中存在qnr和aac(6')-Ib-cr基因阳性菌株的流行,喹诺酮类敏感菌株与耐药菌株中均有qnr基因和aac(6')-Ib-cr基因的存在.qnr和aac(6')-Ib-cr基因往往和ESBLs同时存在,应加强临床分离菌株的质粒介导喹诺酮类抗菌药物耐药基因监测,以防止其传播与流行.
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鲍曼不动杆菌耐药基因aac(6')-Ib和aac(6')-Ib-cr的检测
目的 了解阿米卡星时药的鲍曼不动杆菌中aac(6')-Ib-cr基因的分布情况.方法 收集2007年1月2009年10月临床标本中分高对阿米卡星耐药的鲍曼不动杆菌73株,利用聚合酶链反应(PCR)方法扩增aac(6')-Ib基因,PCR产物进行电泳分析和测序,aac(6')-Ib基因阳性PCR产物用内切酶FOK□酶切后电泳分析.统计菌株对亚胺培南等12种抗生素的耐药率.结果 aac(6')-Ib基因的检出率为89.0%,其中7.7%为突交了的aac(6')-Ib-cr基因.所有菌株对除亚胺培南外的其它抗生素的耐药率均大于80%.结论 aac(6')-Ib基因广泛存在于这些耐药菌株中,突变成aac(6')-Ib-cr基因的发生率较低.这些对阿米卡星耐药的菌株,对其它抗生素的耐药也十分严重.
