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柴胡-黄芩药对保肝作用有效部位的研究
目的 探查柴胡-黄芩药对保肝作用的有效部位.方法 采用乙醇沉淀法,将柴胡-黄芩药对水提液分为A、B、C、D四个部位,以血清ALT、AST为指标,观察柴胡-黄芩药对水提液及其分离部位合并液对CCl4急性肝损伤的保护作用;采用正交试验考察A、B、C、D各部位的保肝效应,后对分析所得的佳配伍进行效用再验证.结果 柴胡-黄芩药对水提液及其分离部位合并液均能明显降低急性CCl4肝损伤模型大鼠血清ALT与AST(P＜0.05或P＜0.01);正交试验表明,C和D对模型大鼠血清ALT与AST均有不同程度地降低作用(P＜0.05或接近0.05),其佳部位配伍为C+D;重复验证实验表明,C+D组能显著降低模型大鼠血清ALT与AST(P＜0.05),其效应与柴胡-黄芩药对水提液相当.结论 部位C、D是柴胡-黄芩药对保肝作用的主要部位.
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柴胡-黄芩药对保肝作用有效部位的研究
目的:探查柴胡-黄芩药对保肝作用的有效部位.方法:采用乙醇沉淀法,将柴胡-黄芩药对水提液分为A、B、C、D 4个部位,以血清ALT、AST为指标,观察柴胡-黄芩药对水提液及其分离部位合并液对CCL4急性肝损伤的保护作用:采用正交试验考察A、B、C、D各部位的保肝效应,后对分析所得的佳配伍进行效用再验证.结果:柴胡-黄芩药对水提液及其分离部位合并液均能明显降低急性CCL4肝损伤模型大鼠血清ALT与AST(P<0.05或P<0.01);正交试验表明.C和D对模型大鼠血清ALT与AST均有不同程度地降低作用(P<0.05或接近0.05),其佳部位配伍为C+D;重复验证实验表明,C+D组能显著降低模型大鼠血清ALT与AST(P<0.05),其效应与柴胡-黄芩药对水提液相当.结论:部位C、D是柴胡-黄芩药对保肝作用的主要部位.
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HPLC法同时测定柴胡-黄芩药对水煎液中皂苷和黄酮类的含量
目的 建立高效液相色谱测定柴胡-黄芩药对水煎液中皂苷和黄酮类含量的方法.方法 采用MERCK PUROSPHER C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:甲醇-0.05%磷酸,梯度洗脱;流速:1.0 mL·min-1;柱温:35℃;检测波长为210 nm.结果 皂苷成分(柴胡皂苷a)、3个黄酮类成分(黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素)达到了完全分离,4个成分的峰面积与进样量线性关系良好.柴胡皂苷a、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素线性范围分别为0.219 6～17.568 μg、0.214 75～17.18 μg、0.093 1～7.448 μg、0.107 6～8.608 μg,(r≥0.999 8);平均回收率分别为97.71%、102.43%、101.16%、97.50%; RSD分别为0.52%、1.96%、1.55%、0.75%.结论 该方法可同时测定柴胡-黄芩药对水煎液中皂苷和黄酮类成分的含量,并能有效表征水煎液中其他成分差别,也为建立柴胡-黄芩药对水煎液特征指纹图谱奠定了基础.
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实验考察柴胡与黄芩配伍前后柴胡皂苷a、d的溶出性差异
目的 通过实验考察柴胡黄芩配伍前后对柴胡药效部位柴胡皂苷溶出的影响.方法 采用梯度高效液相色谱法建立测定柴胡皂苷a、d含量的方法,以相同条件分别提取柴胡药材和柴胡-黄芩药对,实验比较药对配伍前后柴胡皂苷a、d的溶出差异.结果 药对中柴胡皂苷的含量明显高于柴胡药材.结论 柴胡-黄芩药对的配伍,能显著提高药效成分柴胡皂苷的溶出率,临床常将二者配伍应用是合理的、有利于药效的提高.
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基于TLR4-NFκB信号通路的柴胡-黄芩药对抗肝纤维研究
目的:研究柴胡-黄芩药对抗肝纤维化大鼠肝脏TLR4-NFκB通路的影响.方法:采用饲喂高脂饲料,饮用10％乙醇及皮下注射四氯化碳(CCl4)的复合因素法建立大鼠肝纤维化模型,应用柴胡-黄芩药对进行干预,检测大鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、层黏蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)的变化,通过HE染色、Mallory染色探讨肝组织病理变化,应用免疫组织化学方法检测肝脏Toll样受体4(TLR4)、核转录因子(Nuclear factor kB,NFκB)蛋白表达情况,揭示柴胡-黄芩药对抗肝纤维化的作用及可能机制.结果:肝纤维化模型大鼠血清中ALT、AST、HA、PCⅢ和Ⅳ-C的含量明显增高,肝组织纤维蛋白增生明显,并形成假小叶,模型组大鼠肝组织TLR4表达增高.柴胡-黄芩(9、18g生药/kg)干预后,血清中ALT、AST、HA、PCⅢ和Ⅳ-C的含量均有明显降低,肝组织纤维化病理改变有良好改善,肝组织TLR4、NFκB表达也明显下降.结论:柴胡-黄芩药对具有明确抗肝纤维化作用,其机制可能通过TLR4-NFκB信号通路调节,减轻炎症有关.
