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人乳腺癌组织中热休克蛋白70-肽复合物(HSP70-PC)的分离纯化
[目的]建立人肿瘤组织中热休克蛋白-70(hsp70)的分离鉴定方法.[方法]用手术切除的人乳腺癌组织为材料来源,制备匀浆,经100,000r/min超速离心处理后,依次上样于肝素-琼脂糖凝胶、ADP-琼脂糖凝胶柱进行亲和层析,所得蛋白经过7.5%与3.4%双层不连续SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,银染色后经凝胶成像系统分析确定其分子量,再用特异性抗体及碱性磷酸酶标记的二抗做Western Blot进行蛋白质性质与抗原性鉴定.[结果]经肝素-琼脂糖亲和层析后,在离子浓度0.03-0.23mol/L的梯度洗脱范围内得到富含HSP70的组分,其进一步经ADP-琼脂糖亲和层析,洗脱不结合组分,结合组分经鉴定确系相对分子量约为70 000Da的HSP70蛋白.[结论]用上述肝素-琼脂糖凝胶、ADP-琼脂糖凝胶柱进行蛋白质亲和层析法可分离获得纯度高、并保留肿瘤抗原信息的HSP70.
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创伤性休克对兔肾组织不同时相NGAL、Kim-1与HSP70表达影响
目的：探讨创伤性休克对兔肾组织不同时相中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白( NGAL)、肾损伤分子-1(Kim-1)与热休克蛋白70(HSP70)表达的影响。方法健康新西兰大白兔30只,随机分为对照组、0 h模型组、6 h模型组、12 h模型组和24 h模型组,每组6只。通过酶联免疫吸附法( ELISA)、蛋白质印迹法( Western-blot)与实时荧光定量聚合酶链反应( Real-time PCR)测定各组兔血液、尿液及肾组织中NGAL、Kim-1、HSP70的含量与mRNA的表达变化。结果与对照组比较,模型组各时相血液及尿液中NGAL、Kim-1及HSP70含量均升高,6 h开始增加,24 h时有所恢复,但仍为高表达,差异有统计学意义(P<0．05)。与对照组比较,模型组兔肾组织在不同时相NGAL、Kim-1及 HSP70表达量均显著升高,在6 h 时升高明显,差异均有统计学意义( P <0．05)。结论 NGAL、Kim-1、HSP70与创伤性休克导致肾损伤的发生和发展相关。监测血液、尿液及肾组织中NGAL、Kim-1及HSP70的变化情况,有助于对创伤性休克导致肾损伤的判断和治疗。
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肿瘤热休克蛋白70-抗原肽复合物抗移植瘤的实验研究
目的研究肺腺癌有效的治疗方法.方法采用提纯小鼠肺腺癌LA795细胞热休克蛋白抗原肽复合物,对小鼠背部LA795肺腺癌移植瘤进行治疗.结果免疫组和免疫+化疗组移植瘤重量明显减少,小鼠生存期明显延长.结论热休克蛋白70抗原肽复合物有强大的抗肿瘤免疫原性,保护实验动物免受肿瘤细胞的攻击,抑制肿瘤细胞的生长,延长动物生存期.
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热休克蛋白70与创伤愈合关系的研究进展
热休克蛋白70(HSP70)是一类与细胞损伤耐受性有关的细胞应激蛋白,具有细胞保护作用,其主要机制是通过保持细胞内蛋白质的稳定来维持细胞的正常结构.一些研究发现HSP70与细胞增殖及创伤愈合有关,本文综述了HSP70与创伤愈合关系的研究进展.
