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天花粉药材及其类似品的分子鉴别新方法
目的:寻找天花粉类药材快捷准确的分子鉴别方法.方法:在天花粉ITS保守区域设计3个20 mer左右单引物,对19批天花粉商品及其9种伪品进行PCR扩增.结果:引物TkS1-64得到天花粉及其伪品的DNA多态性图谱,其中560 bp和960 bp条带为天花粉的特征鉴别条带.结论:引物TkS1-64具有稳定性好、重复性高的优点,可以作为天花粉类药材分子鉴别引物.此方法定名为锚定引物扩增多态性DNA(anchored primer amplificationpllymorphism DNA,简称APAPD),在中药材鉴别中具有推广应用的价值.
关键词： 天花粉 类似品 分子鉴别 锚定引物扩增多态性DNA -
中药材分子鉴别新方法:锚定引物扩增多态性DNA的研究
为了寻找稳定性好、可操作性强的分子鉴定新方法,在充分吸取RAPD优势的基础上,对其引物和退火温度进行了改进.本文以人参、西洋参为例进行了方法的探索和各种验证,并推广应用到天花粉以及白芷类药材的鉴别.结果显示引物Pg-q36F得到人参、西洋参及其9种伪品的多态性条带.对于人参、西洋参的鉴别结果与文献鉴别方法结果一致,并且具有更高的稳定性.引物TkS1-64F得到了天花粉及其11种伪品的多态性条带,引物AfS1-100F得到白芷及其3种伪品的多态性条带,均能准确鉴别各种药材.实验结果证明本方法具有简单易行、稳定性和重复性好、提供的信息量大等优点,是一种极具前途的中药材分子鉴定新方法,被命名为锚定引物扩增多态性DNA(anchored primer amplification polymorphism DNA,APAPD).
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分子标记在天花粉鉴定中的应用价值研究
目的 探讨特异性PCR方法在鉴定天花粉中的应用价值.方法 选取16份天花粉正品和7份天花粉易混淆品,提取基因组DNA,按照天花粉核糖体RNA中ITS保守区域设计的3个引物进行PCR扩增,1.5％琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物.结果 引物P1(5'-TTCGTTTGAGTTccTTGGCG-3')扩增效果好,佳退火温度为45℃;560bp和960bp条带为天花粉特征鉴定条带,不同栝楼亚种的其他条带略有不同,可将其作为栝楼鉴定的辅助条带.结论 锚定引物扩增多态性DNA技术(APAPD)是一种极有发展前景的中药材分子鉴定方法,可为中药材DNA指纹图谱提供更多信息.
关键词： 天花粉 分子标记 锚定引物扩增多态性DNA 中药伪品
