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高效液相色谱法荧光检测红车轴草提取物中的苯并(α)芘
目的:建立高效液相色谱法荧光检测红车轴草提取物中苯并(α)芘的测定方法.方法:以乙腈-水(70:30)为流动相,流速为1.0 mL·min-1,Hypersil C18色谱柱,荧光检测器检测,激发波长(Ex)为368 nm,发射波长(Em)为405 nm啪.结果:在0.93～37.2 ng·mL-1内峰面积和浓度呈良好线性关系,样品平均回收率为85.2%(n=9).结论:本法可以快速、准确地测定红车轴草提取物中的苯并(α)芘.
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苯并(α)芘诱导GFP转基因小鼠前胃癌模型的建立
目的 转基因小鼠是进行肿瘤研究的良好材料,采用化学诱导剂在绿色荧光蛋白转基因C57BL/6小鼠(GFP-C57BL/6)上建立肿瘤模型.方法 本研究采用苯并(α)芘对GFP-C57BL/6进行前胃癌的诱导实验.结果 苯并(α)芘处理后30周,小鼠前胃肿瘤发生率达到100%,且不会照成对照小鼠胃部损伤.结论 采用苯并(α)芘可以在GFP-C57BL/6小鼠成功建立肿瘤动物模型.
关键词： 诱发性肿瘤模型 苯并(α)芘 GFP-C57BL/6小鼠 前胃癌 -
不同诱导剂诱导GFP转基因小鼠前胃癌效率的比较
目的 采用不同诱导剂在绿色荧光蛋白转基因C57BL/6小鼠(GFP-C57BL/6)上建立肿瘤模型,并比较GFP-C57BL/6小鼠对不同诱导剂敏感性以及肿瘤发生效率的差异.方法 分别采用苯并(a)芘(B(α)P)、3-甲基胆蒽(3-MC)、6-硝基联苯(6-NC)以及肌氨酸乙酯亚硝胺(NSEE)四种诱导剂对GFP-C57BL/6小鼠进行灌胃诱导实验.结果 四种诱导剂均可诱导GFP-C57BL/6小鼠发生前胃癌,B(α)P组肿瘤发生率达到100%,且不会照成该组对照小鼠胃部损伤.结论 B(α)P较为适合作为建立GFP-C57BL/6小鼠前胃癌模型的诱导剂.
关键词： 诱发性肿瘤模型 苯并(α)芘 GFP-C57BL/6小鼠 前胃癌 -
苯并(α)芘致人支气管上皮细胞DNA损伤及与组蛋白H2A单泛素化水平的关系
[目的]通过体外细胞培养途径,探讨苯并(α)芘(benzo[a]pyrene,B[α]P)作用下人支气管上皮细胞(16HBE)DNA损伤与组蛋白H2A单泛素化表达水平的关系. [方法]取对数生长期16HBE细胞,采用2μmol/L B[α]P染毒不同时间(0、1、2、4、8、12、24、48h)进行实验,用碱性单细胞凝胶电泳实验检测细胞DNA损伤水平,并以Olive尾矩值(olive tail moments,OTM)评价DNA损伤程度；用Western-blot法检测组蛋白H2A单泛素化水平. [结果]单细胞凝胶电泳结果显示:2μmol/LB[α]P染毒不同时间时,随着染毒时间的延长,各染毒组细胞DNA损伤程度均明显增高,与对照组相比,差异均有统计学意义( P＜0.01)；Western-blot结果显示:2μmol/L B[α]P染毒不同时间时,与对照组相比,组蛋白H2A的单泛素化水平增高,且在染毒2h后,差异有统计学意义(P＜0.01)；回归分析显示,单泛素化H2A的表达水平与DNA损伤程度存在高度相关,决定系数(R2)为0.910,P＜0.01. [结论]B[α]P染毒致16HBE细胞DNA损伤与组蛋白H2A单泛素化水平之间存在密切关系.
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分子印迹固相萃取-高效液相色谱法测定鱼干中苯并(α)芘方法的研究
目的 建立分子印迹固相萃取-高效液相色谱法测定鱼干中苯并(α)芘方法,检测福建市售鱼干中苯并(α)芘的含量.方法 采用分子印迹固相萃取-高效液相色谱法对鱼干中苯并(α)芘的含量进行测定,并与国家相关的标准方法进行比较.HPLC的条件为:色谱柱:C18反相色谱柱,250mm×4.6 mm.5 μm;流动相:乙腈∶水=88∶12,等度洗脱;柱温:35℃;流速:1.0 ml/min;荧光检测器波长:激发波长(λex)为384 nm、发射波长(λem)406 nm.根据峰面积(Y)对苯并(α)芘浓度(X,ng/ml)进行线性回归,绘制标准曲线,并验证方法的准确度和精密度.采用建立的方法对37份鱼干进行检测.结果 分子印迹固相萃取-高效液相色谱法有高特异性和高稳定性.实验结果表明,苯并(α)芘在0.20 ng/ml～20.0 ng/ml浓度范围内浓度与峰面积具有良好线性相关关系,线性方程为Y=133 916X+5 377.57,相关系数为r=0.999 9,方法的定量限为0.20 μg/kg,在1～10 μg/kg范围内,加标回收率为72.4％～85.1％(n=3).RSD为2.49％～6.61％准确度高,回收率稳定.37份鱼干样品中,21份检测出苯并(α)芘,含量为0.201～2.22 μg/kg.结论 建立分子印迹固相萃取-高效液相色谱法测定鱼干中苯并(α)芘方法.
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高效液相色谱-荧光法快速测定黄连药材中苯并(α)芘的含量
目的:建立黄连药材中苯并(α)芘含量的高效液相色谱荧光检测法.方法:黄连药材应用超声提取、硅胶柱层析等简单前处理方法,含量分析采用Diamonsil ODS2 C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,流动相为乙腈-水(87∶ 13),流速1.0 mL/min,激发波长384 nm,发射波长406 nm,柱温30℃,进样量10 μL.结果:苯并(∞芘在3 ～240 ng/mL含量范围内线性关系良好,线性方程为Y=25801X-22471,r=0.9997.检测限为0.054 ng/mL,定量限为0.188 ng/mL,平均加样回收率为90.14％.结论:该方法具有样品预处理简单,检测成本低,灵敏度高,分析时间短,重现性好等优点,适用于中药黄连中苯并(α)芘含量的快速测定.
