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苦参碱对脂多糖诱导肠组织炎症小鼠血清和组织NO及ADMA代谢通路的影响
目的:探讨苦参碱对脂多糖(LPS)致肠组织炎症小鼠血清和组织一氧化氮(NO)及非对称性二甲基精氨酸(AD-MA)代谢通路的影响.方法:雄性昆明小鼠随机分为5组:正常对照组、LPS组、苦参碱高、中、低剂量组(80,40,20 mg·kg-1·d-1),灌胃3d(正常对照和LPS组灌胃等量蒸馏水),末次灌胃lh后腹腔注射生理盐水或LPS(1 mg· kg-1),于12 h后取血清及组织,测定NO和ADMA水平,观察肠组织病理变化,采用Western blot方法检测小肠组织中蛋白精氨酸甲基转移酶1(PRMT1)和二甲基二甲胺水解酶2(DDAH2)的蛋白表达.结果:与模型组比较苦参碱组(80,40,20 mg·kg-1)均降低血清和组织中NO含量并升高血清ADMA水平,增加肠组织PRMT1表达,但对DDAH2表达无影响.结论:苦参碱可抑制脂多糖诱导的小鼠肠组织炎症.该作用机制与降低血清和组织中NO水平,增加血清ADMA水平和肠组织PRMT1的表达有关.
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瑞舒伐他汀对慢性心力衰竭大鼠的心脏保护作用及其对非对称二甲基精氨酸代谢通路的影响
目的：探讨瑞舒伐他汀对慢性心力衰竭大鼠的心脏保护作用及其对非对称二甲基精氨酸（ADMA）代谢通路的影响。
方法：36只SD大鼠，随机分为异丙肾上腺素模型组、瑞舒伐他汀治疗组、正常对照组，每组12只，建立各组模型。检测血清学相关指标和血流动力学参数，并观察心肌组织病理变化，采用免疫印迹方法检测相关蛋白表达的情况。
结果：与正常对照组比较，异丙肾上腺素模型组脑钠肽、肌钙蛋白I含量、血清ADMA和左心室大下降速率（-LVdP/dtmin）明显升高（P均<0.01）；左心室收缩压、心率、动脉收缩压、平均动脉压和左心室大上升速率（+LVdP/dtmax）均显著降低（P均<0.01），差异均有统计学意义。与异丙肾上腺素模型组比较，瑞舒伐他汀治疗组血清脑钠肽、肌钙蛋白I含量、ADMA水平和-LVdP/dtmin明显降低（P均<0.01）；左心室收缩压、心率、动脉收缩压、平均动脉压和+LVdP/dtmax均显著升高（P均<0.01），差异均有统计学意义。与正常对照组相比，异丙肾上腺素模型组蛋白精氨酸甲基转移酶1（PRMT1）的表达增多（P<0.01），二甲基精氨酸二甲胺水解酶2（DDAH2）的表达降低（P<0.01），差异均有统计学意义。与异丙肾上腺素模型组比较，瑞舒伐他汀治疗组PRMT1的表达明显下降（P<0.01），DDAH2表达差异无统计学意义（P>0.05）。
结论：瑞舒伐他汀对异丙肾上腺素诱导的大鼠慢性心力衰竭心脏具有保护作用，该作用机制与其降低血清肌钙蛋白I、脑钠肽及调控ADMA代谢通路有关。 -
大鼠蛋白精氨酸甲基转移酶1短发夹RNA质粒体外RNA干扰及对Hcy、ADMA的影响
目的 探讨蛋白精氨酸甲基转移酶1短发夹RNA质粒(pPRMT1-shRNA)在体外对大鼠主动脉内皮细胞PRMT1基因mRNA表达水平及同型半胱氨酸(Hcy)、非对称性二甲基精氨酸(ADMA)水平的影响.方法 用pPRMT1-shRNA1、pPRMT1-shRNA2阳性质粒、阴性对照pHK质粒转染大鼠主动脉内皮细胞,同时设立空白对照组.转染12 h、24 h后分别收集各组细胞及细胞培养液,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析各组PRMT1基因的mRNA表达情况,ELISA法检测各组细胞培养液中Hcy及ADMA含量.结果 空白对照组与阴性对照质粒组的PRMT1基因mRNA表达、Hcy、ADMA水平差异无统计学意义;PRMT1-shRNA两组与空白对照组、阴性对照质粒组比较PRMT1基因mRNA表达明显降低(P＜0.01),且Hcy、ADMA水平明显下降(P＜0.01);pPRMT1-shRNA1组比pPRMT1-shRNA2转染组、两组24 h比12 hPRMT1基因mRNA表达受抑更显著(P＜0.05),Hcy、ADMA水平下降更明显(P＜0.05).结论 随着PRMT1基因表达水平下降,Hcy、ADMA水平也随之降低.
关键词： 冠心病 蛋白精氨酸甲基转移酶1 基因干扰 同型半胱氨酸 非对称性二甲基精氨酸 -
编码大鼠PRMT1基因shRNA质粒的构建和鉴定
目的 研究蛋白精氨酸甲基转移酶1(PRMT1)基因表达的改变与血管内皮功能及动脉粥样硬化的关系.方法 构建PRMT1短发夹RNA(shRNA)质粒.在GenBank中查到大鼠PRMT1基因mRNA序列并输入siRNA网上设计软件OptiRNA中,选取两条靶序列,设计并合成编码shRNA序列的DNA单链,经退火连接后,与双酶切线性化处理回收的pGenesil-1质粒载体连接,用含卡那霉素抗性的LB平板筛选阳性克隆,小提质粒后行酶切鉴定并测序.结果 构建的大鼠PRMT1-shRNA质粒经酶切鉴定及测序与预期相符.结论 本研究结果为进一步研究基因干扰PRMT1基因对血浆同型半胱氨酸(Hcy)、非对称性二甲基精氨酸(ADMA)水平及血管内皮功能的影响奠定了基础.
