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白头翁汤正丁醇提取物对碱性pH条件下白念珠菌VVC临床株形态转化的影响
目的:探讨白头翁汤正丁醇提取物(butyl alcohol extract of Baitouweng decoction,BAEB)在碱性条件下对白念珠菌VVC(vulvovaginal candidiasis)临床分离株酵母-菌丝形态转化的影响.方法:采用肉汤稀释法测定白头翁汤不同溶剂萃取物对VVC临床株的低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC);倒置显微镜观察不同pH环境下VVC临床株形态;采用XTT还原法评价在pH 8.0时菌丝活性;扫描电镜观察白念珠菌菌丝形态;荧光显微镜观察菌体代谢活力;固体培养基上观测菌落形态;半固体培养基上观察菌丝侵袭能力;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测菌丝特异性基因ALS3,CSH1,SUN41,HWP1和CaPDE2的表达量.结果:白头翁汤正丁醇提取物(BAEB)对VVC临床株的MIC为64～128 mg· L-1,低于总提取物、石油醚提取物、乙酸乙酯提取物和水提取物的MIC;pH 8.0时VVC临床株的菌丝形成能力强;扫描电镜结果显示512,1 024 mg·L-1的BAEB明显抑制VVC临床株的形态转化,荧光显微镜结果显示1 024 mg·L-1的BAEB可以降低VVC临床株的代谢活性;512,1 024 mg·L-1BAEB浓度的固体菌落未出现褶皱,1 024 mg·L-1BAEB浓度的半固体培养基内部未见菌丝侵袭;qRT-PCR检测显示1 024 mg·L-1时,ALS3,CSH1,SUN41,HWP1分别下调4.26,3.2,2.74,5.12倍,CaPDE2上调2.38倍.结论:BAEB在碱性pH条件下对白念珠菌VVC临床株的形态转化具有抑制作用.
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白头翁汤抑制小鼠阴道念珠菌的增殖并降低炎性细胞因子水平
目的 研究白头翁汤对外阴阴道念珠菌病(vvC)小鼠Th17细胞及炎性因子的调控作用.方法 选取昆明种雌性小鼠72只,随机分为空白对照组、模型组、氟康唑治疗组、(7.5、15.0、22.5) g/kg白头翁汤治疗组.通过对注射雌二醇造成假发情期的小鼠阴道灌注白念珠菌复制出VVC小鼠模型,经过7d治疗,采用稀释涂布法检测VVC小鼠阴道白念珠菌载荷;Gram染色法观察VVC小鼠阴道分泌物白念珠菌形态;ELISA检测VVC小鼠血清中白细胞介素6(IL-6)、IL-17、IL-21、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平;免疫组织化学染色法检测阴道组织中的转录因子维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)的含量.结果 成功建立了VVC小鼠模型;与模型组相比,22.5 g/kg白头翁汤治疗组与氟康唑治疗组的VVC小鼠阴道内白念珠菌载荷数量显著性减少;Gram染色显示,VVC小鼠阴道分泌物中,模型组小鼠含有大量白念珠菌菌丝,7.5 g/kg白头翁汤治疗组小鼠仍有大量较长菌丝,15 g/kg白头翁汤治疗组小鼠虽有菌丝但部分白念珠菌为酵母相,22.5 g/kg白头翁汤治疗组与氟康唑治疗组未见菌丝,只有少量酵母相;经过7d治疗后,与模型组比较,氟康唑治疗组、(15.0、22.5) g/kg白头翁汤治疗组VVC小鼠血清中IL-6、IL-17、IL-21、TNF-α水平降低;氟康唑治疗组、(15.0、22.5) g/kg白头翁汤治疗组VVC小鼠阴道组织中RORγt水平降低.结论 白头翁汤可抑制VVC小鼠白念珠菌增殖并降低炎性细胞因子水平.
