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  • 基于抗凝血酶活性效价的麝香质量生物评价方法研究

    作者:罗云;谭婷;梁新丽;赵海平;廖正根;杨明

    该文尝试建立麝香体外抗凝血酶活性效价测定方法,探索品种和产地对麝香抗凝血酶生物活性的影响,为麝香质量生物评价提供科学依据.采用凝血酶滴定法,考察麝香供试品溶液浓度、纤维蛋白原浓度、凝血酶浓度、凝血酶滴定时间间隔对麝香抗凝血酶活性测定的影响,并比较不同品种和产地麝香抗凝血酶活性的大小.结果显示,麝香供试品溶液浓度在一定范围内(0.01~0.02 g·mL-1),纤维蛋白原浓度为0.5%,凝血酶浓度为10 U·mL-1,滴定间隔时间为1 min,每次滴定2μL时,麝香供试品溶液浓度与凝血酶消耗体积呈良好的线性关系(r=0.9914).不同产地林麝麝香抗凝血酶活性效价为(105.0±10.4)U·g-1,马麝麝香抗凝血酶活性效价为(102.4±5.5)U·g-1,原麝(安徽)麝香抗凝血酶活性效价为(97.7±6.6)U·g-1,人工麝香抗凝血酶活性效价为(58.6±6.4)U·g-1.结果表明,抗凝血酶活性效价测定方法简便、快速、准确、可靠,可用于麝香质量生物评价;品种和产地对麝香抗凝血酶活性影响较大,在麝人工饲养时应注意品种和产地的选择;人工麝香和天然麝香的抗凝血酶活性差异较大,提示人工麝香处方配比可能有待进一步优化.

  • 凝血酶滴定法测定宽体金线蛭抗凝血活性的影响因素

    作者:刘义梅;喻珊;崔瑞勤;陈艳明;陈科力

    目的:对测定宽体金线蛭抗凝血活性的凝血酶滴定方法的影响因素进行分析。方法:用白瓷点滴板代替试管进行滴定反应(简称白瓷板法),考察白瓷板法和常规的试管法、不同凝血酶滴定间隔时间和凝血酶浓度对抗凝血活性测定的影响。结果:在同样条件下,白瓷板法测定抗凝血活性的精确度和稳定性较试管法高。用白瓷板法测定,宽体金线蛭样品浓度在一定范围内(0.125~0.333 g·ml-1)、凝血酶浓度为20 u·ml-1或10 u·ml-1时,每隔1 min滴加1次,每次5μl,样品浓度与消耗的凝血酶体积呈线性相关,r值分别为0.961和0.992;所测得样品的抗凝血活性分别为(33.08±2.64)和(31.24±1.32)u·g-1,RSD分别为8.0%和4.2%;对于0.333 g·ml-1的样品,其测量产生的理论误差不大于10%和5%。结论:白瓷板法可用于测定宽体金线蛭样品的抗凝血活性,用10 u·ml-1的凝血酶溶液,每分钟滴加一次,每次5μl进行测定,其线性和精确度均较好。

  • 宽体金线蛭抗凝血活性物质的提取方法

    作者:万明;汪蜜;刘义梅;喻珊;陈科力

    目的:比较不同提取方法对宽体金线蛭提取物抗凝活性的影响,确定抗凝活性物质的较佳提取方法.方法:应用凝血酶滴定法、APTT试剂盒法、PT试剂盒法等3种检测方法比较干品冷提、干品热提、干品脱脂后热提及鲜品冷提等提取物中抗凝活性的差异.结果:与空白对照组比较,各种提取方法所得提取物均具有明显的抗凝活性,各种检测方法所得结果一致.其中,水蛭鲜品和干品脱脂后提取物中抗凝活性较强.结论:水蛭提取物的抗凝活性强弱与原料的处理和提取方法有关.水蛭干品脱脂有利于提高提取物的抗凝活性.凝血酶滴定法可作为提取物抗凝活性的初步检测方法,其结果稳定,易于操作.APTT、PT试剂盒法可作为抗凝活性进一步检测的方法.

  • 脑血康分散片的制备及其抗凝血酶活性测定

    作者:符美燕;陈燕忠;吕竹芬;谢清春;申楼

    目的 制备脑血康分散片并测定其抗凝血酶活性.方法 采用水提醇沉法提取水蛭浸膏,以微晶纤维素作为主要辅料制备脑血康分散片,采用凝血酶滴定法测定其抗凝血酶活性.结果 所制备的脑血康分散片抗凝血酶活性为23.3~29.2 U/片.结论 该制剂工艺简单、操作方便;凝血酶滴定法简单且准确,可作为脑血康分散片质量控制的一个指标.

  • 活血通脉胶囊制备工艺及质量标准研究

    作者:范尚坦;郑怡;张勇

    目的 探讨活血通脉胶囊的制备工艺及质量标准.方法 采用显微镜观察与TLC法对活血通脉胶囊进行定性鉴别,用凝血酶滴定法测定活血通脉胶囊的含量.在高温、高湿、强光3个影响因素下,从性状、水分、崩解时限、含量等方面考察活血通脉胶囊的稳定性.结果 该产品每1 g含抗凝血酶活性不低于16.0 U,在高温、高湿、强光条件下,稳定性良好.结论 制备工艺合理,检测方法可用于活血通脉胶囊的质量控制.

  • 凝血酶滴定法测定云南菲牛蛭中水蛭素含量的改进研究

    作者:张利;李志远;风云昉

    目的 改进原云南省菲牛蛭质量标准中水蛭素的含量测定方法.方法 考察白瓷板法代替原试管方法、两种浓度的凝血酶溶液、几种滴定体积对含量测定的影响;用原方法和改进后的方法分别对五批样品进行滴定比较.结果 改进后,用白瓷板法测定,配制两种浓度的凝血酶溶液(40NIH·mL-1与20NIH·mL-1),采用几种滴定体积(1~5μL),每1min滴加1次,先滴加高浓度凝血酶溶液初测消耗的凝血酶溶液体积后,再用两种浓度的凝血酶溶液重新进行精确测定;增加空白对照实验,限定反应时间为10min;菲牛蛭样品浓度在0.00678~0.0597g·mL-1(r=0.9983)内与消耗的凝血酶单位量呈线性相关;五批样品的含量为156.68~234.25U·g-1,RSD均小于5%;含量供试品溶液在4℃下24h内稳定.结论 改进后的方法简便、快速,重复性和准确度较原方法好,可作为一种新的云南菲牛蛭水蛭素含量测定方法.

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