首页 > 文献资料
-
茉莉酸甲酯调控下人参发状根皂苷合成相关基因表达的研究
通过外源添加茉莉酸甲酯(MeJA),研究其调控液体培养条件下人参发状根中皂苷生物合成途径相关酶基因在诱导子作用时表达情况.以四年生吉林人参主根诱导的人参发状根无性系为材料,利用香草醛-硫酸比色法测定MeJA 处理前后人参发状根的总皂苷含量;同时,利用荧光实时定量PCR测定MeJA 处理前后人参发状根中鲨烯合成酶(squalene synthase,SQS)、鲨烯环氧酶(squalene epoxidase,SQE)、氧化鲨烯环化酶(oxidized squalene cyclase,OSC)、达玛烷二醇合成酶(dammarenediol synthase,DS)、β-香树脂合成酶(β-amyrin synthase,β-AS)和环阿屯醇合成酶(cycloartenol synthase,CAS)基因的相对表达量.结果表明:获得MeJA添加到人参发状根中佳添加浓度为6×10-4 μmol·L-1、添加时间为22 d、作用时间为5 d;MeJA的添加可以提高人参发状根中过氧化物酶(PPD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(PPD)的酶活性;经过MeJA处理后人参发状根中人参皂苷生物合成途径的SQS,SQE,OSC,DS,β-AS基因的表达变化均有显著提高,然而CAS基因的表达变化不显著.因此说明在添加MeJA处理后,皂苷生物合成途径中SQS,SQE,OSC,DS,β-AS基因表达情况与PPD,CAT,PPO的酶活性的变化趋势也相一致.
关键词： 人参发状根 人参皂苷生物合成 茉莉酸甲酯(MeJA) 基因表达 -
人参Ri质粒转化及代谢产物对HepG2细胞的作用
目的:发状根生产的次生代谢产物含量比植物自身合成的含量高几倍甚至几十倍,利用人参发状根可以生产大量人参皂苷,并有效的抑制癌细胞的增值.方法:通过正交试验设计筛选人参发状根诱导的条件,通过发状根生物积累量和皂苷含量的测定确定培养条件,然后利用MTT法测定了人参皂苷对HepG2细胞的影响.结果:本实验优化了人参发状根的佳诱导条件,吸光度A 0.6,侵染时间为10 min,预培养时间为3d,筛选出发状根的佳培养条件,MS培养基,pH6.1,24℃培养时,发状根的生物积累量和皂苷含均较高,采用人参总皂苷对肝癌细胞HepG2的抑制效果进行研究,证实人参总皂苷对HepG2的抑制率与给药浓度呈正相关.结论:筛选出适的人参发状根诱导及培养条件,不同部位的总皂苷对肝癌细胞HepG2的增殖均具有抑制作用.
-
人参发状根低聚糖的单糖组成分析
目的:建立高效液相色谱法测定人参发状根低聚糖的单糖组成.方法:采用水提醇沉法对人参发状根低聚糖进行提取,以1-苯基-3-甲基-5-吡唑酮(PMP)为柱前衍生化试剂,采用高效液相色谱分析单糖组成,色谱条件:色谱柱为Agilent Edipse XDB-C18(200 mm ×4.6 mm,5μm);流动相A为0.1 mol/L磷酸盐缓冲溶液(pH 7.0),B为乙腈;洗脱体积A:B =80.4:19.6;流速1.0 mL/min;检测波长245 nm.结果:人参发状根低聚糖中甘露糖(Man)、鼠李糖(Rha)、葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)、阿拉伯糖(Ara)的摩尔比为1.00: 1.23:4.63: 1.42:1.15.结论:该方法测定人参发状根低聚糖的单糖组成,实验简便、稳定,结果准确、可靠.
