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甲基化敏感性扩增多态性文献资料
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花叶型与艾叶型乌头叶片基因组DNA甲基化修饰的MSAP分析
建立乌头叶片DNA甲基化MSAP分析方法,并对不同形状的乌头叶片DNA甲基化修饰位点进行MSAP分析.以花叶型、艾叶型乌头不同部位叶片为实验材料,考察乌头叶片MSAP双酶切反应时间,筛选适宜的选择性扩增引物,并通过计算6％丙烯酰胺凝胶电泳图泳道和条带统计分析叶片甲基化修饰差异.结果150 ng乌头叶片DNA MSAP双酶切反应体系在37℃条件下,酶切16h较充分;使用25对筛选出的适宜性引物进行乌头基因组的MSAP选择性扩增,总共获得273个电泳条带,其中无甲基化或单链内甲基化228条,双链内甲基化条带27条,单链外甲基化条带18条,总甲基化率达16.48％;花叶型与艾叶型乌头总甲基化率稍有差异,分别为15.36％,14.34％,并各自获得8条、6条基因组甲基化修饰差异的核苷酸片段,占其总条带数的3.00％,2.26％.通过研究可为乌头植株的分子鉴定、良种选育与栽培,以及乌头的遗传演化等提供新思路.
关键词： 乌头 叶型 甲基化敏感性扩增多态性
