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温阳豁痰熄风法治疗早发性癫痫性脑病1例
本例患儿是类细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶5基因(CDKL5)变异导致癫痫发作,属于早发性癫痫性脑病的范畴.本病抗癫痫药物控制不佳,并且具有精神运动发育落后等表现.根据患儿的病理性体质以及症状体征辨证为脾肾阳虚,温煦乏力,痰浊日久不化之阴痫.治以温阳豁痰、熄风止痉,以达标本兼施之目的,临床短期疗效显著.
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siRNA沉默Cdkl5对原代皮质神经元Mecp2及其下游靶基因表达的影响
目的 探讨CDKL5在Rett综合征中与MeCP2相互作用的机制.方法 体外培养孕18 dSD胎鼠皮质神经元,通过小RNA干扰技术(siRNA)敲低Cdkl5,分为干扰组(Cdkl5 shRNA)和对照组(control shRNA).用Real time-PCR及Western blot法评估Cdkl5在mRNA和蛋白水平被敲低的效率;Cdkl5表达降低后Mecp2和Mecp2相关的下游靶基因表达变化.对Cdkl5 shRNA转染后神经元用CCK8法检测吸光度值评估神经元活力;用real time-PCR和West-em blot法检测凋亡基因caspase3和凋亡活性蛋白cleaved-caspase3评估神经元凋亡状态.结果 干扰组与对照组比较,Cdkl5在mRNA水平下降73％,在蛋白水平下降75％(P＜0.05);Mecp2在mRNA和蛋白水平升高约2倍(P ＜0.05);BdnfⅪ在mRNA水平明显下降,Psd95在mRNA水平明显上升(P＜0.05).结论 建立稳定的Cdkl5基因敲低的原代皮质神经元模型,并初步提示CDKL5可能通过对MeCP2的调控诱导了下游靶基因的变化.
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CDKL5在胃癌中的表达及其临床意义
目的 研究丝/苏氨酸激酶周期素依赖性激酶样-5 (CDKL5)在胃癌组织中的表达,并分析其与胃癌患者的临床病理特征之间的关系.方法 应用荧光实时定量PCR法和免疫印迹法分别检测45例胃癌及其癌旁组织中CDKL5 mRNA及蛋白的表达,然后用免疫荧光方法检测CDKL5蛋白在AGS和MKN-45胃癌细胞株中的表达情况.结果 CDKL5 mRNA和蛋白在胃癌组织中的表达均明显高于其在相应的癌旁组织中的表达(P＜0.05);CDKL5 mRNA的表达与胃癌患者的年龄(P=0.033)、血管浸润(P=0.007)、T分期(P=0.049)和TNM分期(P=0.041)有关;多重逐步回归分析结果显示,血管浸润(P=0.013)和TNM分期(P=0.024)是影响CDKL5mRNA表达的重要因素;胃癌组织和细胞株中CDKL5蛋白除了在相对分子质量为107×103条带处显影外,还检测到在相对分子质量为85×103处的显影条带.结论 CDKL5在胃癌组织和细胞中均呈高表达,其mRNA表达与胃癌患者的血管浸润和TNM分期有关;CDKL5蛋白分别在相对分子质量为107×103和85×103条带处显影,提示CDKL5在蛋白水平可能存在不同的修饰方式或者表达方式.
