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H5N1禽流感病毒血凝素抗原快速检测试剂对不同现场标本的检测比较
利用H5亚型禽流感病毒血凝素抗原快速检测试剂"H5-HA(Ag)Dot-ELISA(H5-Dot)"对来自陆禽、水禽的484份气管拭子、泄殖腔拭子和粪便拭子标本进行检测,结果:①不同采集方式的H5N1阳性标本的检出率高低有别,气管拭子的检出率高,泄殖腔拭子次之,粪便拭子低(P＜0.05),因此建议现场采样时应尽可能采集气管拭子标本;②陆禽标本检出率显著高于水禽标本(P＜0.05),对病毒培养阳性的陆禽气管拭子检出率达80%(95%CI:70.6%～87.8%),对水禽气管拭子标本的检出率为38%(95%CI:26.9%～49.4%),可能与标本中病毒滴度高低有关;③有症状与无症状陆禽标本的检出率无显著差异.另外,H5-Dot试剂对333份非H5病毒气管拭子标本的特异性为99.4%(95%CI:97.9%～99.9%).这些结果表明,H5-Dot是一种较为可靠的H5亚型禽流感病毒早期快速检测方法,在缺乏仪器设施和高素质专业技术人员的H5N1禽流感病毒防控第一线具有重要推广价值.
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一种新型H5N1禽流感病毒血凝素抗原快速检测试剂的建立
利用5株广谱特异性抗H5亚型血凝素单克隆抗体和酶联免疫渗滤技术成功地建立了一种适于现场检测H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白的抗原快速检测试剂H5-HA(Ag) Dot-ELISA.该试剂对41株代表当前亚洲地区流行的各种遗传变异亚系H5N1禽流感病毒检测均为阳性,对多数毒株的分析灵敏度优于0.1 个血凝滴度 (HA titer),其中部分优于0.01 个血凝滴度;比较该试剂与早期开发的同类ELISA试剂,发现前者对后者未能检出的H5N1新变异株检测均为阳性;利用该试剂和商品化Directigen Flu A(BD)试剂检测两株H5N1病毒株,提示前者灵敏度高于后者;该试剂对一株H5N1病毒的检测灵敏度与标准RT-PCR相当;该试剂对24株非H5亚型病毒检测均为阴性,显示出良好特异性.以上结果提示,此研究建立的H5N1病毒抗原快速检测试剂在H5禽流感现场检测上具有较好的应用前景.
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胶体金免疫层析试剂盒对甲型H1N1流感病毒(2009)抗原快速检测的敏感性分析
目的 了解胶体金免疫层析试剂盒对甲型H1N1流感病毒(2009)抗原快速检测的敏感性.方法分别用甲型流感病毒抗原检测试剂盒(胶体金免疫层析法)和甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒(胶体金免疫层析法)对171例疑似甲型H1N1流感(2009)患者鼻咽拭子标本进行检测,以实时荧光定量聚合酶链反应(FQpCR)核酸检测结果为参考,比较胶体金免疫层析试剂盒对不同病程以及不同病毒核酸载量标本检测的敏感性.结果 2种试剂盒的检测敏感性与标本的病毒核酸载量呈正相关(P＜0.0l),病毒载量≥108拷贝/mL时均可达73.3％.同时,2种试剂盒的阳性检出率与标本的病程呈负相关(P＜0.01),发病1～2d时分别为66.7％和62.5％,推测其在实际应用中的理论敏感性分别可达77.3％和74.6％.结论 胶体金免疫层析试剂盒检测甲型H1N1流感病毒(2009)在发病初期及病毒载量较高时有较好的检测效果,可帮助临床早期诊断和海关口岸等机构的现场筛查.但鉴于胶体金免疫层析法自身的局限性,其结果只能作为初步参考,终的确认结果应以PCR结果为准.
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胶体金免疫层析法对呼吸道合胞病毒抗原快速检测结果分析
目的：分析胶体金免疫层析法对呼吸道合胞病毒（RSV）抗原快速检测的灵敏度和特异度。方法用 RSV 抗原检测试剂盒（胶体金免疫层析法）对197例疑似 RSV 感染患者的鼻咽抽吸物或鼻咽拭子标本进行检测，以反转录聚合酶链反应（RT-PCR）核酸检测结果为参考，比较胶体金免疫层析法对不同类型标本和不同年龄组患者的灵敏度。结果197例患者标本中经 RT-PCR 检测，95例（48．2％）为阳性。以 RT-PCR 核酸检测结果为标准，胶体金免疫层析法的灵敏度和特异度分别是34．7％和100％。该方法对鼻咽抽吸物的阳性检出率较鼻咽拭子高（36．2％对8．6％，P ＜0．01），鼻咽抽吸物标本的灵敏度明显高于鼻咽拭子（22．1％对12．6％）。RSV 检出率与年龄呈负相关（P ＜0．01），1岁以下患儿的阳性检出率高（29．5％），而在＞5岁患儿中阳性检出率为0。结论胶体金免疫层析法对1岁以下幼儿的鼻咽抽吸物中的 RSV 有较好检测效果，可辅助临床进行早期筛查。但鉴于该方法灵敏度较低，且适用于5岁以下儿童，临床上还需用 RT-PCR 对 RSV 进行确认和补充检测，以免漏诊。
