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重组人PrP文献资料
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N端八肽重复区数目对人重组PrP与金属离子结合后的蛋白酶抗性及与tau蛋白结合能力的影响
人类朊病毒病中约10%～15%具有家族遗传特性,其中插入或缺失突变多发生于PrP蛋白N末端的八肽重复区域.运用PCR成功地构建并表达了含不同八肽重复数目的PrP蛋白,并观察八肽重复数目的增加对PrP与Cu2+等二价离子以及tau蛋白的相互作用的影响.实验结果显示:各种纯化后的PrP蛋白对常规浓度PK消化是敏感的,而与Cu2+共同孵育可使PrP蛋白的PK抗性增强;八肽重复序列的数目及Cu2+的浓度决定了PK抗性的出现和强弱.另外,Mn2+可诱导产生与Cu2+相似的结果,但其诱导效应似乎低于Cu2+,而Zn2+对PrP蛋白的PK抗性无影响.GST-tau包被的ELISA检测证实,重组的PrP呈现出明显的tau蛋白结合能力,并且与八肽重复序列的数量相关,重复序列数量越多,结合能力越强.这些结果提示,Cu2+诱导产生的PrP蛋白PK抗性是通过八肽重复序列区域产生的,并且直接与重复序列的数量相关.另外,PrP蛋白八肽重复序列的存在和数量直接影响PrP与tau蛋白的结合效应.除了八肽区域外,PrP蛋白其它区域似乎也具有一定的tau蛋白结合能力.
