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一种携带人α1bIFN的单纯疱疹病毒载体的构建
为研究用单纯疱疹病毒作为表达细胞因子载体的生物重要性,构建了一种表达人α1b干扰素(IFN)的新型单纯疱疹病毒载体.基于一组含有完整单纯疱疹病毒全基因组的粘粒,α1b IFN表达盒插入到cosmid6上HSV1的UL2基因中,生成cos6-αIFN△UL2.通过将cos6-αIFN/△UL2与cosmid28、cosmid14、cosmid56和cosmid48共转染BHK-21细胞,同源重组产生重组病毒HSV1-αIFN/△UL2.在体外用标准VSV空斑抑制试验检测重组毒感染细胞上清α1b IFN的表达.证实HSV1-αIFN/△UL2感染的细胞中表达的人α1bIFN是有生物活性的.MOI=10感染时,24h后产生2.8×104IU/ml.而对照病毒感染时,这些细胞并不分泌可以检测到的α1bIFN.鉴于HSV1载体的嗜神经性,该载体对于分析体内神经系统局部表达的IFN的抗病毒能力是有用的.
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一种可切除包装信号的重组1型单纯疱疹病毒的产生
单纯疱疹病毒1型(HSV1)能感染几乎所有类型的细胞,尤其具有嗜神经细胞的特点,可经神经细胞的突触顺行或逆行传播,并能在神经元中建立稳定的隐性感染而不影响神经细胞的功能.因此,HSV1可望用作将外源基因导入机体细胞,尤其是神经细胞的一种新型病毒载体[1].
关键词: 重组单纯疱疹病毒 包装信号 Cre/Loxp系统 扩增子病毒载体