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肝活素酶联免疫吸附分析方法的建立及应用
目的 建立肝活素(Hepassocin)酶联免疫吸附分析方法(ELISA).方法 使用两株抗体,一株包被微孔板,另外一株用HRP标记.显色系统使用TMB显色.结果 测定范围在20 ~ 1000ng/mL,低检测限在10ng/mL,回收率在93.9%~ 103.1%之间,批内和批间变异为9.7%和7.8%,正常参考值为<20ng/mL.结论 用1000份临床样本考核本试剂盒,与参比试剂盒有很好的临床符合性,与参比试剂盒具有同等的临床使用价值.
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肝活素(HPS)--一种新的小鼠急性肝损伤标志物
目的:急性肝衰竭是目前临床上导致死亡的重要病因之一,研究具有肝特异性、灵敏度高的肝损伤标志物对于严重肝病的早期诊断以及预后预测具有重要的意义。肝活素( hepassocin,HPS)是一种具有高度组织特异性的促肝细胞增殖活性因子,在动物水平检测其在血清中的表达水平与肝损伤程度的相关性将为其开发成临床检测急性肝损伤的特异性标志物奠定基础。方法利用腹腔注射不同剂量CCl4处理诱导小鼠急性肝损伤模型,检测小鼠的存活率、转氨酶水平以及肝病理变化。通过ELISA检测小鼠血清的HPS水平;实时PCR法检测HPS mRNA水平;Western印迹法检测HPS的蛋白表达水平。结果随着CCl4处理剂量的增加,小鼠死亡率显著升高,肝损伤程度显著增加,在此过程中,HPS在小鼠血清及肝组织中的表达水平也显著上调,并与肝损伤程度密切相关。结论HPS可做为一种新的小鼠肝损伤标志物。
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肝损伤患者血清肝活素水平测定的临床意义
目的 探究肝活素(HPS)在阻塞性黄疸所致肝损伤的诊断以及慢性肝病肝功能评估中的作用.方法 ELISA法检测60例阻塞性黄疸患者、68例慢性肝病患者及30例健康体检者血清HPS水平.分析肝损伤患者与正常人血清HPS水平有无差异;对阻塞性黄疸患者血清HPS和丙氨酸氨基转移酶(ALT)进行相关性分析;绘制受试者工作特征曲线,观察HPS对阻塞性黄疸所致肝损伤的诊断价值;分析慢性肝病患者HPS与Child-Pugh分级(CPC)以及肝衰竭之间的关系.结果 阻塞性黄疸和慢性肝病患者血清HPS水平均显著高于对照组(P<0.01).阻塞性黄疸患者血清中HPS与ALT呈正相关性(rs=0.914,P<0.01);HPS在阻塞性黄疸肝损伤诊断中的曲线下面积达到0.938,佳节点是141.87 μg/L;慢性肝病中非衰竭者Child A、Child B、Child C与慢加急性肝衰竭、慢性肝衰竭5组之间两两比较,非肝衰竭组中,随着CPC升高,HPS水平也逐渐升高(P<0.05),两组肝衰竭血清HPS水平均高于非衰竭各组(P<0.05),两组肝衰竭之间HPS水平差异无统计学意义.结论 血清HPS水平测定能够对阻塞性黄疸患者有无肝损伤作出诊断,也能够辅助CPC评估慢性肝病患者肝功能.