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  • MicroRNA-125b在胃癌组织中的高表达并促进胃癌细胞系HGC-27和MGC-803的增殖

    作者:阎文婷;蒋凤兵;王芳;余佳;冯涛

    目的 探讨microRNA-125b(miR-125b)基因在胃癌患者组织中的表达改变情况,及其对胃癌细胞系增殖和凋亡的影响.方法 使用real-time PCR方法检测miR-125b在40例临床诊断为胃癌患者的癌组织与癌旁对照组织中的表达情况.随后使用miR-125b mimic转染胃癌细胞系HGC-27和MGC-803,确认过表达成功后,分别使用CCK-8试剂盒和流式细胞仪检测过表达miR-125b对细胞增殖和凋亡的影响.结果 证实在胃癌患者组织中miR-125b的表达水平显著高于癌旁对照组(P<0.01).在胃癌细胞系HGC-27和MGC-803中过表达miR-125b后,细胞增殖明显增加:转染72 h,HGC-27(scramble组:1.632±0.09,mimic组:2.473±0.08),MGC-803(scramble组:1.603±0.05,mimic组:2.554±0.07)),同时细胞凋亡也受到抑制.结论 miR-125b可能作为癌基因在胃癌中发挥作用,并对细胞增殖和凋亡具有显著影响.

  • 急性髓系白血病患者MicroRNA-125b表达与不同亚型的相关性分析

    作者:司叶俊;张彦明

    目的 探讨急性白血病患者MicroRNA-125b (miR-125b)表达与不同亚型的相关性.方法 选取2015年1月至2015年12月间江苏省徐州医学院附属淮安医院收治的67例急性髓系白血病初发患者为观察组,选取同期的30例非恶性血液病患者为对照组,采用实时荧光定量PCR检测两组患者骨髓细胞中的miR-125b表达水平,比较不同亚型患者与对照组患者之间的表达差异,并分析miR-125b表达水平与化疗疗效的相关性.结果 观察组M1~M6型的miR-125b表达量分别为(2.1±0.4),(2.2±0.4),(3.4±1.0),(1.9±0.4),(1.9±0.3)和(1.8±0.4),对照组的miR-125b表达量为(0.8±0.2),所有亚型患者的miR-125b表达水平均显著高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05),且M3型患者的miR-125b表达水平显著高于其他亚型,差异有统计学意义(P<0.05).观察组治疗前,观察组治疗后缓解和治疗后未缓解患者的miR-125b表达量分别为(2.9±0.4),(1.6±0.2)和(2.5±0.3),对照组则为(0.8±0.2),与治疗前比较,化疗缓解患者的miR-125b水平明显降低,但仍显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 急性髓系白血病患者存在miR-125b过度表达现象,且化疗缓解患者的miR-125b表达水平较治疗前显著降低,说明miR-125b表达水平可能与急性髓系白血病的发生发展相关.

  • microRNA-125b在肿瘤发生发展中的研究进展

    作者:赵雪煜;钱亚云

    恶性肿瘤是导致人类死亡的重要因素之一.恶性肿瘤的发生与某特定基因的异常表达密切相关.microRNA-125b(miR-125b)是一个非编码的小RNA分子,它在不同的生物学变化中均有举足轻重的地位.越来越多的研究显示对某些特定恶性肿瘤的诊断,miR-125b或许能作为其先进的生物标志,并且可能成为其医学治疗的潜在新靶点.根据miR-125b与肿瘤之间关系的新研究成果,综述其在细胞增殖、耐药、侵袭转移及凋亡等多个方面对肿瘤的发生发展产生的具体影响.

  • microRNA-125b在骨肉瘤患者血清中的表达及增殖抑制作用

    作者:肖文峰;罗伟;肖凯;杨拓;李宇晟

    目的:研究microRNA-125b在骨肉瘤患者血清中的表达及增殖抑制作用。方法选取2014年1月至2015年1月本院收治的20例骨肉瘤患者纳入观察组,另选取同期20例健康体检者纳入对照组。应用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应检测两组研究对象血清、骨肉瘤组织及肉瘤旁正常组织中microRNA-125b的表达水平;转染microRNA-125b抑制物后,采用流式细胞仪检测骨肉瘤细胞在G0/G1期、S期、G2/M期所占的比例。结果 microRNA-125b在观察组患者血清中的表达水平明显低于对照组(P<0.05);microRNA-125b在两组患者正常组织中的表达水平比较无显著差异(P>0.05);microRNA-125b在骨肉瘤的诊断中,其灵敏度为90%,特异度为95%;骨肉瘤细胞(SOSP-9607)转染microRNA-125b抑制物24小时后,处于G0/G1期的细胞比率明显高于未转染组(P<0.05),且处于G2/M期及S期的骨肉瘤细胞比率明显低于未转染组(P<0.05)。结论骨肉瘤组织中microRNA-125b的表达水平明显下降,增加microRNA-125b的表达水平可抑制骨肉瘤细胞的增殖,且监测microRNA-125b水平有助于诊断骨肉瘤。

  • 氧糖剥夺诱导原代大鼠星形胶质细胞增殖反应中microRNA-125b的表达变化

    作者:范玉颖;于涛;王华;张俊梅;赵晓春

    目的 研究氧糖剥夺诱导原代大鼠星形胶质细胞增殖过程中microRNA-125b的表达,探讨microRNA-125b是否参与了缺氧缺血性脑损伤后星形胶质细胞的增殖.方法 原代大鼠星形胶质细胞随机分为正常组和氧糖剥夺组,分别培养3、6和9h.EdU掺入法检测各组星形胶质细胞的增殖,real-timePCR方法检测各组星形胶质细胞microRNA-125b的表达.结果 氧糖剥夺组microRNA-125b的表达水平随培养时间延长呈先升高后降低的动态变化,3h开始高于对照组水平(P<0.05);6h达高峰(P<0.01),随后下降,9h与对照组无差异(P>0.05).氧糖剥夺不同时间星形胶质细胞增殖变化与microRNA-125b的变化趋势一致.结论 microRNA-125b可能参与缺氧缺血性脑损伤后星形胶质细胞的增殖.

  • microRNA-125b在Flk1~+脂肪源间充质干细胞向神经分化过程中的表达变化

    作者:王世华;边春景;黄珊;赵春华

    背景:间充质干细胞的分化受遗传和表观遗传因素的严格调控,越来越多的研究表明microRNA也在这一过程中发挥重要的调控作用.目的:观察microRNA-125b在Flk1~+ 1间充质干细胞向神经细胞分化过程中的表达变化.方法:成人脂肪样品取自15~35岁健康志愿者,贴壁培养法获得间充质干细胞,采用神经诱导培养基对第3代间充质干细胞进行诱导培养.在诱导第0,4,8,12天检测microRNA-125b的表达情况.应用microRNA芯片技术检测间充质干细胞在神经诱导前后microRNA-125b的表达差异并采用反转录-聚合酶链反应和Taqman real-time PCR的方法进行验证.检测inhibitor抑制microRNA-125b表达的有效性.结果与结论:①实验成功诱导间充质干细胞向神经分化,诱导培养后12 d观察到细胞形态发生变化;大部分细胞胞体回缩,呈球形,并有轴突形成,免疫荧光检测结果显示,分化后的细胞表达神经元、星形胶质细胞特征性表面标志.②RT-PCR和Taqman real-time PCR显示神经诱导后microRNA-125b表达明显升高,与microRNA芯片结果一致.③inhibitor可以有效抑制microRNA-125b的表达.提示microRNA-125b可能在间充质干细胞成神经分化过程中起调控作用.

  • MicroRNA-125b对人牙周膜干细胞成骨分化的影响

    作者:杜莉;曹伟靖;田莹;王原明

    目的:探讨microRNA-125b (miR-125b)对人牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cell,PDLSCs)成骨分化的影响.方法:利用组织块法分离培养PDLSCs,流式细胞术检测细胞表面标志分子.PDLSCs经miR-125b模拟物或miR-125b抑制剂转染后,采用MTT法和LDH试剂盒分别检测细胞活性和细胞毒性,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性和细胞内钙离子水平均以相应试剂盒检测,Western印迹法和RT-qPCR检测成骨相关基因水平.双荧光素酶基因报告实验检测miR-125b对细胞间隙连接蛋白43 (connexin43,Cx43)的靶向调控作用.采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析.结果:体外分离培养的PDLSCs呈现间充质干细胞特性.转染miR-125bmimic后,PDLSCs的活性下降,毒性上升,ALP活性、钙离子水平以及成骨相关分子水平均显著下降;相反,antimiR125b提高了PDLSCs的细胞活性、ALP活性、钙离子水平以及成骨相关分子的表达.双荧光素酶基因报告实验结果表明,miR-125b能够靶向降低Cx43基因水平.而在Cx43过表达的PDLSCs中,miR-125b模拟物对PDLSCs成骨分化的作用被反转.结论:miR-125b通过靶向下调Cx43而抑制PDLSCs的成骨分化.

  • 急性格林巴利综合征患者外周血microRNA-146a、microRNA-125b表达及其与免疫球蛋白、炎症因子的相关性研究

    作者:黄攀;徐敏;何晓英

    目的 探讨急性格林巴利综合征患者外周血清中microRNA-146a、microRNA-125b的表达水平与免疫球蛋白、炎症细胞因子的相关性.方法 选取我院神经内科收治的84例急性格林巴利综合征患者作为试验组(GBS组),另选取50例正常体检者作为对照组.采用RT-PCR技术检测所有纳入者外周血清中microRNA-146a、microRNA-125b的表达水平,采用免疫比浊法检测所有纳入者外周血清中免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)的水平,采用酶联免疫吸附法检测所有纳入者外周血清中IL-6、CRP、TNF-α的水平.比较2组患者外周血清中microRNA-146a、microRNA-125b的表达水平,采用Spearman相关性分析方法分析microRNA-146a、microRNA-125b分别与免疫球蛋白、炎症因子的相关性.结果 试验组外周血清中microRNA-146a表达水平高于正常组,而microRNA-125b的表达水平低于正常组,差异均有统计学意义(P<0.05);试验组外周血清中IL-6、CRP、TNF-α、IgG表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Spearman相关性分析表明microRNA-146a与IL-6、CRP、TNF-α、IgG具有正相关性,而microRNA-125b与IL-6、CRP、TNF-α、IgG具有负相关性,差异均有统计学意义(P<0.05);而microRNA-146a及microRNA-125b与IgA、IgM无明显相关性.结论 急性格林巴利综合征患者外周血清中microRNA-146a、microRNA-125b存在差异表达谱,并且二者可能是通过调控免疫及炎症反应进而参与急性格林巴利综合征的发病.

  • microRNA-125b在葛根素诱导人卵巢癌细胞SKOV3凋亡中的作用研究

    作者:张悦;段海霞;暴蕾;符乔珊

    目的 探讨micRNA-125b在葛根素诱导卵巢癌细胞SKOV3凋亡中的重要作用.方法 运用qRT-PCR技术检测葛根素处理卵巢癌细胞SKOV3中microRNA-125b的改变.运用干涉RNA技术抑制SKOV3细胞中microRNA-125b表达.运用Western blot技术检测SKOV3细胞microRNA-125b低表达后,葛根素处理组与对照组中凋亡相关蛋白的改变.结果 葛根素能够显著抑制卵巢癌细胞SKOV3的增殖活力以及促进其凋亡相关蛋白Cleaved Caspase-3,Bax和Bcl-2的表达,并且初步揭示了葛根素处理卵巢癌细胞SKOV3后能够促进microRNA-125b的表达;抑制卵巢癌细胞SKOV3中microRNA-125b的表达能够降低葛根素对SKOV3细胞凋亡蛋白Cleaved Caspase-3,Bax和Bcl-2的表达.结论 microRNA-125b参与了葛根素对卵巢癌细胞SKOV3的促凋亡作用,提示microRNA-125b是卵巢癌细胞SKOV3耐药机制中的关键分子.

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