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间充质干细胞对不同刺激条件下Th1/Th2细胞比值的影响
目的 探讨间充质干细胞(MSC)对不同刺激作用下T淋巴细胞向Th1及Th2亚群转化的影响.方法 将MSC植入24孔板中,在第3天加入经佛波脂(PMA)及离子霉素(ionomycin)刺激的T淋巴细胞,或者按照不同比例将MSC加人双向混合淋巴细胞培养体系中,用流式细胞术分析各组T淋巴细胞亚群和内因子IL-4、IFN-γ的分泌变化情况,从而间接了解Th1及Th2亚群的改变.结果 对于共刺激作用下单独培养的T细胞,MSC能轻度抑制其Th1细胞的转化;而在混合淋巴细胞培养体系(MLC)中,MSC能够明显抑制其中的CD8+T细胞亚群和Th1细胞,轻度提高Th2细胞比率.结论 MSC在体外能抑制CD8+T细胞(CTL)和Th1细胞,升高Th2细胞.所以在临床上可能有减轻移植后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的发生,而保留移植物抗白血病(GVL)的潜力.
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rhC5a对外周血单个核细胞PKC活性的影响
目的:观察外周血单个核细胞(PBMC)在rhC5a诱导后蛋白激酶C(PKC)活性变化及其特点.方法:将PBMC与rhC5a置体积分数为0.05的CO2中37℃孵育,按一定时间间隔收集细胞,然后测定PKC活性.结果:PBMC经rhC5a诱导后PKC活性呈双峰型增高.结论:C5a细胞内信号转导过程与PKC活化有关.
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佛波脂对体外培养Th细胞表面CD4分子表达的影响
目的探索佛波脂(PMA)对Th细胞表面CD4分子表达的影响.方法用荧光标记的抗CD3/4/8抗体同经10、15、20、25ng/mL的PMA和1μg/mL的Ionomycin刺激培养2、3、4 h的正常人外周全血细胞中的Th细胞上的CD4分子结合,溶血后用流式细胞仪检测CD4通道的荧光强度(MFI).结果CD4通道的MFI随PMA质量浓度的升高和刺激时间的延长而降低.结论Th细胞表面CD4分子在刺激培养过程中随PMA质量浓度的升高和刺激时间的延长而减少.
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不同诱导剂体外诱导巨噬细胞胞外诱捕网形成效率的比较
目的 比较体外诱导巨噬细胞胞外诱捕网(MET)形成的不同方法.方法 采用(0.5、1、5、10) μg/mL脂多糖(LPS)、(10、25、50、80) μmol/L佛波酯(PMA)和(50、100、150) μg/mL二氧化硅(SiO2)处理RAW264.7细胞,在处理后3h和6h,采用免疫荧光染色法检测MET的产生,并对其进行半定量分析.结果 免疫荧光染色表明MET主要由DNA和组蛋白构成,1μg/mL LPS处理RAW264.7细胞6h,MET形成百分比为(37.04±10.02)％,明显高于对照组(7.90士2.71)％;80 μmol/L的PMA处理细胞后MET形成百分比为(22.40±1.83)％,高于对照组(10.11±1.13)％;各剂量的SiO2诱导MET的量与对照组无明显差异.结论 用LPS和PMA均能在体外诱导RAW264.7细胞MET的形成,SiO2诱导不是可行的方法.
关键词： 巨噬细胞胞外诱捕网 RAW264.7细胞 脂多糖 佛波脂 二氧化硅 -
大鼠腹腔巨噬细胞表达促肾上腺皮质激素释放激素的实验研究
目的 观察促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)在大鼠腹腔巨噬细胞的表达变化规律.方法 体外培养大鼠腹腔巨噬细胞,采用RT-PCR及ELISA技术检测正常及脂多糖(LPS)、佛波脂(PMA)刺激后,细胞CRH mRNA转录水平及CRH多肽合成水平.结果 RT-PCR结果显示,正常大鼠腹腔巨噬细胞内有一定水平的CRH mRNA,LPS及PMA刺激后,细胞内CRH mRNA水平均显著增高(P＜0.01).在多肽水平,正常大鼠腹腔巨噬细胞可表达低水平的CRH[约(0.07±0.01)ng/107cells],LPS及PMA促进了CRH多肽的合成(P＜0.01).结论 正常大鼠腹腔巨噬细胞可合成表达CRH,其水平在活化后大鼠腹腔巨噬细胞显著上调.
关键词： 巨噬细胞 促肾上腺皮质激素释放激素 脂多糖 佛波脂
