首页 > 文献资料
-
小鼠胚胎干细胞的体外培养及诱导分化成酪氨酸羟化酶阳性神经元
探索小鼠胚胎干细胞(ES)在体外培养及向酪氨酸羟化酶阳性神经元诱导分化的可能性.将小鼠胚胎干细胞在含有白血病抑制因子(LIF)的ES培养基中扩增,并通过以下几个步骤:胚胎体的形成、巢蛋白(Nestin)阳性细胞的筛选、Nestin阳性细胞的体外扩增及撤除碱性成纤维细胞生长因子等后观察向酪氨酸羟化酶阳性神经元的分化.结果表明小鼠胚胎干细胞在含有LIF的特定培养基中能够稳定传代并保持不分化状态,经过无血清培养基的筛选和培养,在Sonic Hedgehog(SHH) 及成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor 8,FGF8)等细胞因子的作用下能定向分化成酪氨酸羟化酶阳性神经元.这种方法有望为帕金森病等神经变性病的细胞移植治疗提供充足的细胞来源.
关键词： 小鼠胚胎干细胞 酪氨酸羟化酶阳性神经元 诱导分化 -
抗帕颗粒对帕金森病模型小鼠酪氨酸羟化酶神经元的影响
目的 探讨抗帕颗粒对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)帕金森病(PD)模型小鼠黑质纹状体酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元的影响.方法 90只健康雄性C57BL/6小鼠,鼠龄8～12周,并随机分为3组,即正常对照组30只、PD模型对照组30只、PD模型干预组30只;MPTP腹腔注射(40 mg·kg-1·d-1×7 d)制备小鼠PD模型;正常对照组及PD模型对照组予生理盐水1 mL· d-1灌胃,PD模型干预组给予抗帕颗粒40 mg· kg-·d-1灌胃,连续喂养4个月;黑质纹状体切片、HE染色、免疫组织化学染色TH神经元及Western blotting检测TH蛋白的表达量.结果 ①正常对照组30只(30/30只)终均存活,PD模型对照组4个月存活27只(27/30只),PD模型干预组4个月存活28只(28/30只);②PD模型对照组、PD模型干预组小鼠每次注射MPTP后先有短暂兴奋[持续(7.61±2.17) min],表现为四处窜跳,随即出现全身中重度震颤,皮毛及尾巴时有竖立,活动减少,持续(24.23±3.89)min后震颤消失,随后出现活动减少;③HE染色显示正常对照组大量褐色TH阳性细胞,PD模型对照组TH阳性细胞数明显减少,PD模型干预组TH阳性细胞数有所增加;④免疫组织化学染色后经Imagepro-Plus 5.1系统分析,正常对照组TH阳性细胞面积为64 145 μm2,高倍镜下可见大量胞质为褐色颗粒的TH阳性细胞;PD模型对照组TH阳性细胞染色面积为40 012 μm2,高倍镜下见TH细胞数明显减少;PD模型干预组TH阳性细胞染色面积为60 952 μm2,高倍镜下见TH阳性细胞数较PD模型对照组增加;⑤Western blotting检测显示正常对照组TH蛋白表达量与PD模型对照组和PD模型干预组比较均有明显差异(P＜0.001),PD模型对照组TH蛋白表达量与PD模型干预组比较也有明显差异(P＜0.05).结论 抗帕颗粒可使PD小鼠黑质纹状体中多巴胺能神经元一定程度地减少丢失,对多巴胺能神经元的数量、形态及功能具有一定的保护作用.
关键词： 帕金森病 1-甲基-4-苯基-1 2 3 6-四氢吡啶 小鼠模型 抗帕颗粒 酪氨酸羟化酶阳性神经元
