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刀豆蛋白A活化小鼠巨噬细胞机理的初步探讨
探讨了刀豆蛋白A(ConA)活化巨噬细胞(Mφ)的机理.以ConA 500μg腹腔注入预处理小鼠48h,并以PBS作对照,免疫组织化学染色法检测诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)的表达;分别以原位杂交及流式细胞仪检测NF-кBP65 mRNA与NF-к:B RelA蛋白的表达;RT-PCR了解TNF-α、IL-1β mRNA的表达情况.ConA刺激后,iNOS在胞浆中表达增多;ConA处理组NF-кB P65 mRNA及NF-кB RelA蛋白的表达均增加,RT-PCR方法测到TNF-α、IL-1β mRNA的表达水平也显著提高(P<0.01).ConA作用于Mφ时,可能通过活化NF-кB使iNOS、TNF-α及IL-1β表达增强,从而提高其生物学功能.
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肝吸虫排泄分泌抗原对豚鼠腹膜MφNO产量的影响
目的:研究排泄分泌抗原(ESA)对豚鼠腹膜Mφ亚硝酸盐产量的影响方法:ESA与Mφ培养2小时后再加入LPS培养48小时,测上清液中NO含量.结果:实验组NO含量明显降低结论:ESA在肝吸虫的免疫逃避过程中起到了一定作用.
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三七皂甙对烫伤小鼠巨噬细胞IP3→CaM信号途径的影响
目的研究中药三七皂甙对巨噬细胞(MΦ)肌醇脂质信号系统中IP3→CaM途径的调理作用。方法用中药三七皂甙治疗烫伤昆明种小鼠,通过观察伤鼠MΦ的PLC活性、IP3活性、胞内Ca2+浓度、CaM量和它们参与产生分泌的IL-1。结果三七皂甙能使伤后该途径中升高的信使物质及其产物PLC、IP3、胞内Ca2+、CaM和它们参与产生分泌的IL-1得到一定程度的调理。三七皂甙可使升高的PLC活性从(57.58±8.91)μmol/L降到(27.00±2.31)μmol/L、可使升高的IP3活性从(18 844.5±2 445.9)Bq/106 cell降到(4 169.7±543.3)Bq/106 cell、可使升高的胞内Ca2+浓度从(393.18±39.62) nmol/L降到(90.56±7.21) nmol/L、可使升高的CaM量从(598.15±50.21) nmol/L降至(316.31±25.35) nmol/L、可使升高的IL-1量从0.998±0.058降至0.590±0.050。结论中药三七皂甙对肌醇脂质信号系统中IP3→CaM途径具有较好的调理作用。
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小鼠妊娠期间巨噬细胞功能的变化及原理的探讨
目的了解妊娠期间小鼠腹腔巨噬细胞产生NO、IL-1、MCP-1的功能及NF-κB表达的变化 .方法分别以Griess试剂、胸腺细胞增殖法测MΦ产生NO、IL-1的水平,以免疫组化法检测MΦ表达NF-κB及产生MCP-1的水平.结果妊娠小鼠腹腔MΦ产生NO、IL-1、MCP-1的能力明显高于同龄雌性未孕鼠,胞内NF-κB表达水平也较高.结论妊娠期间MΦ处于活化状态,产生效应分子的能力升高.
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ConA增强MΦ吞噬功能、杀瘤效应及产生效应分子的研究
目的 了解ConA在体内对小鼠腹腔MΦ吞噬功能、细胞毒作用及产生NO、TNF-α、IL-1的影响。方法 分别测MΦ吞噬鸡红细胞的能力,以S180为靶细胞测MΦ依赖的细胞毒作用。以griess试剂、L929细胞MTT检测法、胸腺细胞增殖法测MΦ产生NO、TNF-α、IL-1的水平。结果 ConA活化的腹腔MΦ吞噬鸡红细胞的能力以及对S180细胞的细胞毒作用显著强于PBS对照组(P<0.01),并产生较高水平的NO、TNF-α、IL-1。结论 ConA能活化MΦ产生NO等效应分子,发挥对MΦ的免疫调节作用。
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低氧对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力及氧依赖杀伤功能的影响
目的 探讨低氧对小鼠腹腔巨噬细胞(Mφ)吞噬杀伤能力,IL-6、TNF-α分泌功能的影响.方法 ①用流式细胞仪检测小鼠腹腔MφP对FITC标记金黄色葡萄球菌的吞噬能力;②用双乙酰基二氯荧光素(DCFH-DA)荧光探针法检测Mφ呼吸爆发功能;③用ELISA试剂盒检测小鼠Mφ培养上清中的NO浓度;④用ELISA试剂盒检测小鼠腹腔Mφ培养上清中的IL-6、TNF-α浓度.结果 低氧暴露30 d后,模拟海拔5000 m实验组小鼠与常氧对照组(海拔400m)相比,小鼠腹腔Mφ吞噬能力、呼吸爆发能力及NO释放量显著降低(P<0.05),细胞培养上清中的IL-6、TNF-α的浓度明显升高(P<0.05).结论 模拟海拔5000 m低氧暴露30 d后,Mφ的吞噬能力和氧依赖杀伤功能降低,Mφ分泌IL-6、TNF-α的水平升高.说明低氧在一定程度上降低Mφ抗原清除能力并引发炎性反应.