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三磷酸鸟苷酸环化水解酶Ⅰ文献资料
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人三磷酸鸟苷酸环化水解酶Ⅰ基因的克隆与表达
目的研究人三磷酸鸟苷酸环化水解酶Ⅰ(GCHⅠ)基因在多巴胺代谢过程中的作用. 方法从人胚胎肝脏中提取总RNA,以RT-PCR法扩增GCHⅠ cDNA,克隆于PGEM-T-easy载体中,测序正确后再构建真核表达载体,转染猴肾成纤维细胞系COS7,原位杂交检测其表达. 结果 RT-PCR扩增出904bp的cDNA,并成功构建真核表达载体pCI-neo-GCHⅠ,原位杂交证实其在COS7表达阳性率为70%～80%. 结论 GCHⅠ有望用于帕金森病的基因治疗.
关键词： 三磷酸鸟苷酸环化水解酶Ⅰ RT-PCR 原位杂交 人胚肝脏
